【摘 要】
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本研究是为了探索一种更为简便、特异性强、灵敏高的隐孢子虫卵囊DNA抽提方法。通过采用FYA filter paper、Fast DNA(r)SPIN for Soil Kit、UNIQ-10柱式基因组抽提试剂盒三种方法制备样品DNA模板，根据隐孢子虫SSU rRNA设内外两对引物进行巢式PCR扩增。三种方法制备的样品DNA模板分别进行巢式PCR扩增，均可获得一条830bp条带。利用以上三种抽提的D
【机 构】
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华东理工大学,上海 200237 上海出入境检验检疫局,上海 200135
【出 处】
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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
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本研究是为了探索一种更为简便、特异性强、灵敏高的隐孢子虫卵囊DNA抽提方法。通过采用FYA filter paper、Fast DNA(r)SPIN for Soil Kit、UNIQ-10柱式基因组抽提试剂盒三种方法制备样品DNA模板，根据隐孢子虫SSU rRNA设内外两对引物进行巢式PCR扩增。三种方法制备的样品DNA模板分别进行巢式PCR扩增，均可获得一条830bp条带。利用以上三种抽提的DNA进行PCR检测的灵敏度分别为1.26个/ml、12.6个/ml、126个/ml。从本实验得到结论为：三种方法制备的样品DNA模板均可用于巢式PCR检测，其中FTA filter paper方法抽提的DNA方法简便、特异性强、灵敏度高。
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80羽10日龄小鸡随机分成免疫组和非免疫对照组，用H5亚型AI油乳灭活苗免疫后，用细胞中和试验(SN)测定其血清中的的中和抗体水平的动态变化并绘出曲线图。10天龄小鸡抽血后分组并进行首免，第17日龄时平均中和抗体水平为1.0Log2。28日龄时平均中和抗体水平为1.5Log2，此时进行二免，以后每隔5天检一次抗体水平，Ⅱ免后的第48日龄时SN抗体水平迅速提高至5.2Log2。63日龄三免，第69日
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