【摘 要】
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脯氨酸内肽酶(prolyl endopeptidase,PEP) [EC 3.4.21.26]是一种特殊的丝氨酸蛋白酶,可特异性水解多肽链中含有脯氨酸残基的羧基端肽键.在鱼体中,PEP与鱼类胶原蛋白的新陈代谢密切相关.本研究利用RT-PCR方法并结合cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)克隆得到脯氨酸内肽酶基因序列.该序列全长3029
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院,福建厦门361021 集美大学食品与生物工程学院,福建厦门361021
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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脯氨酸内肽酶(prolyl endopeptidase,PEP) [EC 3.4.21.26]是一种特殊的丝氨酸蛋白酶,可特异性水解多肽链中含有脯氨酸残基的羧基端肽键.在鱼体中,PEP与鱼类胶原蛋白的新陈代谢密切相关.本研究利用RT-PCR方法并结合cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)克隆得到脯氨酸内肽酶基因序列.该序列全长3029 bp,开放阅读框为2223bp,编码741个氨基酸残基,其理论分子质量84.12 kDa,等电点5.81,不含信号肽.该序列与大黄鱼(Larimic hthyscrocea)等有较高的同源性.同时,应用所获PEP基因序列,以鲈鱼18S基因的序列为内参,利用荧光定量PCR技术,检测PEP在鲈鱼肌肉、肝脏、皮、肠、鳃、脑和心脏等7个组织中的表达情况.结果 表明,PEP在7个组织中均有表达,在心脏中表达量最高,鳃、脑、肝胰脏、肌肉、鱼皮中的表达量依次递减,在肠中的表达量最低.利用同源性建模法构建的脯氨酸内肽酶属于α/β水解酶超家族,与野猪(Sus scrofa)PEP具有较高相似性.本研究为解明PEP在鱼类中的生理功能提供了参考.
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