【摘 要】
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发酵乳杆菌CECT5716（Lactobacillus fermentum CECT5716）分离自健康人乳,是一株优良益生菌,研究表明其具有良好的安全性,且具有抗氧化、调节免疫、治疗乳腺炎等功能,极具开发利用前景。本研究对其高密度培养基组成、培养条件和冻干保护剂进行了选择和优化,主要研究结果如下:（1）以MRS培养基为基础,通过单因素和正交试验优化发酵乳杆菌CECT5716培养基和培养条件,得到
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发酵乳杆菌CECT5716（Lactobacillus fermentum CECT5716）分离自健康人乳,是一株优良益生菌,研究表明其具有良好的安全性,且具有抗氧化、调节免疫、治疗乳腺炎等功能,极具开发利用前景。本研究对其高密度培养基组成、培养条件和冻干保护剂进行了选择和优化,主要研究结果如下:（1）以MRS培养基为基础,通过单因素和正交试验优化发酵乳杆菌CECT5716培养基和培养条件,得到最佳培养基为:酵母膏4.5%,乳糖0.7%,葡萄糖1.3%,乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二胺0.2%,磷酸氢二钾0.2%,Mg SO40.02%,Mn SO40.005%,Tween-80 0.05%,胡萝卜汁4%。最适培养条件:初始p H 5.8-6.2、接种量3%、厌氧静置培养16h,优化后的活菌数为3.69×1010CFU/m L,是优化前的2.81倍。（2）在上一步实验基础上,对培养基成分进行了简化,使用1 L自动发酵罐优化培养条件。得出发酵罐培养基为:葡萄糖1.5%、乳糖0.5%、乙酸钠0.5%,溶于除沉处理后的玉米浆干粉溶液,定容至1 L,调p H至6.0,115℃灭菌15 min备用;最适发酵条件为:温度37℃,转速100 rpm,匀速流加1 mol/L的Na2CO3溶液将p H稳定在6.0左右,并在培养至16h左右时将300 m L的碳氮比为1:3的补料液（成分同培养基）加入反应体系中,继续发酵至38 h。优化后的培养基组分简单,且培养基成本降低;优化后活菌数为3.03×1011CFU/m L,比优化前的活菌数提高了2个数量级。（3）优化了发酵乳杆菌CECT5716的真空冷冻干燥保护剂。得到适宜该菌株的最佳保护剂配方为:脱脂乳粉18%、麦芽糊精3%、海藻糖7%,菌液与保护剂比例为1:2。最终冻干得到的菌粉活菌数达6.1×1011CFU/g,冻干存活率为91.58%;且该保护剂能在5个月内将4℃保藏的菌粉活菌数保持在90%以上,提供稳定的保护效果。
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