NSCLC组织中长链非编码MALAT-1 RNA的表达及临床意义

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背景和目的肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一,也是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。其中非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)占肺癌所有类型的80-85%,但NSCLC患者的5年生存率却只有15%。NSCLC患者之所以出现较高的死亡率,很大程度上与肺癌早期发现困难,就诊时能够接受根治性手术的患者少相关。癌细胞的转移是导致癌症死亡的最常见原因。转移的过程是肿瘤细胞通过局部浸润、渗入血管、进入血液循环系统并在其中存活、移出血管、在新的部位定居并增殖而完成的。复杂的、多步骤的转移过程是由特异的基因产物和基因突变决定的。到目前为止,还没有可靠的生物标志物能够精确预测早期NSCLC患者的转移过程。因此,寻求一种有效的早期筛查、早期诊断及指导预后的肺癌生物标志物就显得非常重要。目前已有大量研究表明,非编码RNA在癌症发生发展过程中具有重要的作用。所谓非编码RNA,是指不编码蛋白质的RNA。依据其所含碱基数量的多少,划分为不参与蛋白质编码功能的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和小分子RNA(如miRNA、siRNA、piRNA等)。人体中的非编码RNA大部分是不参与蛋白质编码功能的lncRNA。LncRNA主要在表观修饰、转录及转录后这三种层面上调控基因的表达。哺乳动物MALAT-1(metastasis associated in lung adenocarcinoma transcript)基因位于染色体11q13上,转录物是lncRNA,长度大于8000nt,广泛存在于人类和小鼠正常组织的细胞核内。MALAT-1表达序列在进化上的高度保守性提示其可能具有某些潜在的重要功能。国外已有大量文献报道MALAT-1在多种肿瘤中存在异常表达,在肺癌中也提示其表达水平升高,但是选取的研究人群均为高加索裔,对于亚裔人群肺癌中的表达目前还没有相关报道。因此,在亚裔肺癌人群中检测癌组织及其癌旁正常组织中MALAT-1的表达,了解其表达特征与肺癌患者临床特征的关系,可能有助于了解肺癌的发生、发展机制,并能对肺癌的早期筛查、早期诊断提供指导。材料与方法1材料来源选取2007年1月至2008年1月在河南省肿瘤医院就诊的NSCLC患者作为研究对象,采集手术后患者肺癌原发灶及其对应的正常肺组织标本,共获得有效标本76例。按照WHO标准(2004版)进行组织学分类及UICC(2009年第7版)标准进行TNM分期。2实验方法采用Trizol法提取组织中的总RNA,并对RNA进行反转录。采用实时荧光定量PCR方法对MALAT-1的表达进行检测。3统计学方法试验结果输入SPSS17.0软件数据库,数据经对数转换后,经正态性检验数据呈正态分布,以α=0.05作为检验水准。配对的肿瘤与正常组织中MALAT-1表达比较采用配对t检验,MALAT-1表达与肺癌临床病理特征的关系采用χ2分析。应用Kaplan-Meier单因素和Cox多因素进行生存分析。结果1实时荧光定量PCR测定结果58%(44/76)肺癌患者的癌组织中MALAT-1表达水平显著低于其对应的正常肺组织中的水平(t=-7.648,P<0.001)。2肺癌组织中MALAT-1表达水平与临床病理特征的关系肺癌组织中的MALAT-1的表达水平与吸烟史、细胞分化程度、组织学类型以及术后转移有相关性(P<0.05)。3MALAT-1表达和患者预后的关系MALAT-1高表达组的患者生存期明显长于MALAT-1低表达组;Cox多因素回归分析显示细胞分化程度,转移,病理类型和MALAT-1表达水平是影响NSCLC患者预后的独立因素。结论1MALAT-1与肺癌发生发展密切相关,在肺癌发生的过程中具有“抑癌基因”的作用。2MALAT-1表达降低与吸烟肺癌、鳞癌、肿瘤细胞的分化和转移相关。3MALAT-1表达降低提示患者预后差,且为NSCLC患者的独立危险因素。其将来可能作为NSCLC预后判断的分子标志物。
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