【摘 要】
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目的:以脂肪族聚酯为原料,制备同时含有诱导骨组织再生的功能层（GBRL）和抑制成纤维细胞增殖（AFL）作用的功能层的复合纤维膜,在体外验证其相应功能后再于大鼠下颌骨缺损模型中验证其骨修复作用,继而为该材料用于修复牙周炎引起的牙槽骨组织缺失提供依据。方法:应用静电纺丝技术制备了四种（M1、M2、M3和M4）功能化（GBRL和AFL）可吸收复合纤维膜,使用扫描电镜观察其表面结构和不同时间的降解状况。体
【基金项目】
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市校合作项目（NSMC20170442）；
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目的:以脂肪族聚酯为原料,制备同时含有诱导骨组织再生的功能层（GBRL）和抑制成纤维细胞增殖（AFL）作用的功能层的复合纤维膜,在体外验证其相应功能后再于大鼠下颌骨缺损模型中验证其骨修复作用,继而为该材料用于修复牙周炎引起的牙槽骨组织缺失提供依据。方法:应用静电纺丝技术制备了四种（M1、M2、M3和M4）功能化（GBRL和AFL）可吸收复合纤维膜,使用扫描电镜观察其表面结构和不同时间的降解状况。体外实验:分别将四种膜置于96孔板之孔,后加入小鼠成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）和小鼠胚胎成纤维细胞（L929）进行培养,于实验的第1、4、7天用CCK8试剂盒检测MC3T3-E1的OD值（450nm）,于第1、2、3天用CCK8试剂盒检测L929的OD值（450nm）;同时观察了四种膜对牙龈卟啉单胞菌的抑制效果。体内实验:雄性（200±20g）SD大鼠30只,随机分为6组（空白对照组CN、胶原蛋白膜组COL、实验组M1、M2、M3和M4）,戊巴比妥钠（4.0mg/100g）麻醉后暴露下颌骨,用牙科手机钻通单侧下颌骨,造成直径为3mm的骨缺损,对照组不做任何处理、COL组大鼠在骨损处分别贴上胶原蛋白膜、实验组M1、M2、M3和M4组大鼠分别于骨缺损处的两侧植入相应的脂肪族聚酯复合纤维膜。手术结束后的首日和随后第2周、第4周、第6周和第8周用小动物PET-CT观察大鼠骨缺损的修复情况,并用Mimics Medical21.0软件进行三维重建、测量每只大鼠的骨缺损体积,并计算每只大鼠的新生骨体积分数[（首日骨损体积—各时间点骨损体积）/首日骨损体积]。8周后处死大鼠,取出下颌骨,脱钙后进行观察HE染色和Masson染色,观察各组骨缺损区的组织学差异。结果:扫描电子显微镜观察显示:各组脂肪族聚酯复合纤维膜的纤维表面均光滑,直径均匀,纤维无序交叉排列形成多孔结构,该结构与细胞外基质（ECM）具备一定程度的相似性。CCK8实验表明成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）在各组脂肪族聚酯复合纤维膜的GBRL面均能正常增殖,其中M1上的MC3T3-E1细胞相对其它组增值速度更快（P＜0.05）;各组脂肪族聚酯复合纤维膜的AFL面对胚胎成纤维细胞（L929）的增殖有显著抑制作用,其中M1的抑制作用稍差（P＜0.05）。细菌抑制实验表明M3和M4对牙龈卟啉单胞菌具有显著的抑制效果,但M1和M2作用不明显。体内实验显示:在CT动态观察的终点,CN、COL、M1、M2、M3和M4的新生骨体积分数均值分别为33.2%、63.4%、82.2%、70.9%、84.8%和75.1%,COL、M1、M2、M3和M4新骨体积分数均高于对照组（P＜0.05）,M3的新骨体积分数比COL多21.35%（P＜0.05）,而M1、M2、M4的均值比COL分别多 18.79%、7.44%、11.65%（P＞0.05）。组织形态学,COL、M1、M2、M3和M4均未见软组织侵入骨组织内,CN可见部分骨组织不连续,少量软组织侵入骨缺损区。结论:本类脂肪族聚酯复合纤维膜在体外能使成骨细胞前体细胞正常增殖,抑制成纤维细胞的增殖,并具有抑菌效果;在体内能促进骨缺损的修复,比临床应用的口腔修复膜-胶原蛋白膜效果更佳,极有希望用于牙周炎骨缺损的修复治疗。
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