再生障碍性贫血是严重威胁人类健康的血液系统疾病,目前认为免疫功能异常是导致发病的主要原因,淋巴细胞活化的背后必然伴有细胞的能量代谢重组,但具体何种代谢方式参与再障的发生尚不得而知。此外,环孢素A作为治疗再障的一线用药,可显著抑制骨髓淋巴细胞的增殖,除传统经典作用途径外,它是否同时具有通过抑制淋巴细胞的代谢发挥治疗作用的功能也不清楚。为解决以上科学问题,本论文进行了以下三方面的研究,旨在为再障的根治提供潜在的药物靶点和治疗策略。首先探讨了再障表型改变及环孢素A治疗再障的疗效评估。我们使用免疫介导的经典方法构建再障小鼠模型并予以Cs A治疗,发病第13天小鼠体重、外周血三系、骨髓形态学、骨髓有核细胞总量、HSC比例等指标均出现显著下降,同时伴有骨髓内外炎症因子的高表达以及小鼠生存时间的明显缩短;而使用Cs A干预后这些指标则有不同程度的改善,说明药物治疗有效,这与临床结论相一致。接着我们对再障相关的骨髓微环境进行了分析,发现MSC、血管内皮细胞、巨核细胞均遭受不同程度的破坏,伴有脂肪细胞生成增多;而予Cs A治疗后可部分逆转这一现象,提示Cs A具有保护骨髓微环境的功能。随后探讨了再障骨髓淋巴细胞的增殖状态和代谢途径及环孢素A对这一过程的影响。我们首先检测了再障骨髓淋巴细胞的比例和周期状态,发现T细胞弥漫浸润骨髓且以处于G1期为主;而予Cs A处理后淋巴细胞比例明显下降同时伴有周期由G1向G0期发生转变。接着通过RNA-seq和流式分析发现线粒体氧化磷酸化是再障骨髓T细胞的主要代谢途径;而使用Cs A干预后线粒体的功能下降,说明其具有抑制T细胞线粒体氧化磷酸化的作用。最后探讨了何种供能原料参与再障骨髓淋巴细胞的代谢重组及环孢素A抑制这一过程的具体作用机制。我们首先检测了T细胞对葡萄糖的吸收能力,结果显示无差异性,说明再障时淋巴细胞进行了不同于其他疾病的代谢重编程。接着通过RNA-seq、流式分析证实游离脂肪酸参与了淋巴细胞的代谢重组;但予Cs A处理后T细胞却较再障时表现出更强的脂肪酸吸收能力,这说明其不是通过抑制脂肪酸吸收而可能是通过抑制脂肪酸氧化发挥作用,并证实Cpt-1a关键酶是其作用靶点。之后我们使用Cpt-1a的抑制剂进行功能验证,发现其在改善再障方面疗效优于Cs A。综上所述,我们首次证实游离脂肪酸参与了再障骨髓淋巴细胞的代谢重组进而延伸了Cs A通过抑制Cpt-1a靶点影响淋巴细胞的脂肪酸代谢发挥治疗再障的作用机制,这为临床提供了新的治疗思路。