【摘 要】
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目的:探究棕榈酸（Palmitic Acid,PA）对心肌细胞自噬功能的影响及潜在机制。方法:提取大鼠乳鼠心肌细胞（Neonatal Rat Cardiomyocytes,NRCMs）并体外培养24 h,分别加入10%BSA以及不同浓度的PA（0、0.1、0.3、0.5、0.7 mmol/L）共培养24 h。Western blotting检测NRCMs中自噬指标（PINK1、Parkin、p62
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目的:探究棕榈酸（Palmitic Acid,PA）对心肌细胞自噬功能的影响及潜在机制。方法:提取大鼠乳鼠心肌细胞（Neonatal Rat Cardiomyocytes,NRCMs）并体外培养24 h,分别加入10%BSA以及不同浓度的PA（0、0.1、0.3、0.5、0.7 mmol/L）共培养24 h。Western blotting检测NRCMs中自噬指标（PINK1、Parkin、p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）以及c GAS、STING、p-IRF3/IRF3的蛋白表达水平。CCK8法检测细胞活性,筛选0.7mmol/LPA用于后续实验。进一步将c GAS si RNA转染入NRCMs中以敲降c GAS的表达,将NRCMs细胞分为:空白对照组（Control组,无特殊处理）、阴性对照组（NC组,转染NC序列）、c GAS si RNA组（转染c GAS-si RNA敲降c GAS）、PA组（0.7 mmol/L PA处理24 h）、c GAS si RNA+PA组（转染c GAS-si RNA后予以0.7 mmol/L PA处理24h）。Western blot检测NRCMs自噬相关蛋白指标表达变化,CCK8法检测细胞活性,免疫荧光检测p62和LC3阳性着色情况。结果:经不同浓度PA作用24 h后,NRCMs中PINK1、Parkin,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ+Ⅱ蛋白表达量明显降低（P＜0.05）,p62蛋白表达量明显增高（P＜0.05）,且心肌细胞活性明显下降（P＜0.05）。将c GAS敲降后,可明显逆转PA诱导的NRCMs自噬功能降低,并改善心肌细胞活性（P＜0.05）。结论:PA通过介导c GAS-STING-IRF3通路激活,抑制心肌细胞的自噬功能,导致细胞活性降低。
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