论文部分内容阅读
目的:赶黄草又名扯根菜Penthorum chinense Pursh是虎耳草科Saxifragaceae扯根菜属Penthorum Gronov.ex L.植物。赶黄草具有很好保护、治疗肝损伤的作用,是新食品原料,具有很好的药食两用前景。本研究目的主要分为以下两部分:第一部分研究赶黄草泡腾片的原-辅料配比,优选出最佳制备工艺,对其建立初步的质量标准评价体系以及对其质量稳定性进行研究;第二部分以小鼠为研究对象探究赶黄草泡腾片对四氯化碳所致肝损伤以及急性酒精性肝损伤的保护作用。本课题旨在研发一款具有护肝作用的保健食品,为赶黄草资源的深入开发、利用提供有效的科学依据。方法:1.采用乙醇回流法提取赶黄草黄酮成分,浓缩、干燥并研磨成赶黄草干浸膏粉末,采用紫外分光光度法测量其中赶黄草浸膏中黄酮的含量。2.采用酸碱混合制粒方法压片,通过单因素实验筛选最佳辅料。采用Box-Behnken设计的方法以及感官评价得分对赶黄草泡腾片的原辅料配比进行优化。3.按照2020版《中国药典》制剂通则项下对泡腾片的要求对其外观性状、片重差异、硬度、脆碎度、发泡量、p H值、崩解时间、薄层色谱分析和含量测定进行质量分析。4.将制备的赶黄草泡腾片进行高温、高湿和强光照射试验以及长期和加速试验,检查制剂的外观性状、崩解时限和指标成分的含量变化情况。考察影响赶黄草泡腾片稳定性的因素。5.研究分为四氯化碳肝损伤实验组和急性酒精性肝损伤实验组,每组60只昆明种小鼠,每组再分为空白组、模型组、阳性组(联苯双酯滴丸0.15g·kg-1)、赶黄草泡腾片高、中、低剂量组(8、4、2 g·kg-1),每组10只。各实验组连续灌胃给药一段时间,末次给药后除空白组外,其余各组制备相应肝损伤模型,禁食后处死,测量小鼠的肝脏指数、生化指标以及肝组织切片的病理学检查,研究赶黄草泡腾片的抗四氯化碳肝损伤和急性酒精性肝损伤的保护作用。结果:1.通过测定,得到黄酮含量为31.52%的赶黄草醇提物浸膏粉。2.通过单因素实验筛选的辅料为柠檬酸、碳酸氢钠、甜菊糖苷、PEG6000和乳糖。通过响应面设计得出柠檬酸:碳酸氢钠为1.4:1,最佳原-辅料比例为赶黄草浸膏粉10.0%、崩解剂34.0%、甜菊糖苷5.0%、聚乙二醇6000 6.0%、乳糖45.0%。3.根据最佳制备工艺制备的赶黄草泡腾片表面光滑、颜色均匀、无松片裂片现象,表面呈浅黄绿色,口味佳,泡腾片中不完整、表面粗糙、色泽不均匀、畸形、有较大花斑或严重异物者较少。平均片重0.48 g、重量差异为2%,产气量6.5 m L,硬度33.60 N,脆碎度1.0%,崩解时限3′43″,p H值在4.82~5.15之间呈弱酸性。4.温度、湿度和光照条件是影响赶黄草泡腾片质量稳定性的重要因素,在接近实际包装的条件下,加速试验结果显示温度是让赶黄草泡腾片失效的最大因素。长期试验结果显示在12个月内赶黄草泡腾片的各项指标变化均不明显,质量稳定。5.四氯化碳实验组:与模型组相比,赶黄草泡腾片中、高剂量组能降低肝损伤小鼠肝脏指数(P<0.01,P<0.05);赶黄草泡腾片低、中、高剂量组能降低ALT、AST水平(P<0.01),降低TNF-α释放和提高SOD活性(P<0.05),赶黄草泡腾片中、高剂量组能升高GSH活性以及降低MDA水平(P<0.05),赶黄草泡腾片各剂量组对CCl4所致的肝脏病理损伤具有一定的保护作用。酒精实验组:与模型组相比,赶黄草泡腾片各剂量组均能降低肝脏指数、ALT和LDL-C含量(P<0.01,P<0.05,P<0.01),赶黄草泡腾片中、高剂量组可降低AST水平(P<0.05),赶黄草泡腾片低、中剂量组可升高SOD活性(P<0.05,P<0.01),赶黄草泡腾片各剂量组增加GSH的活性(P<0.05,P<0.01),赶黄草泡腾片中、高剂量组可降低TG水平(P<0.05),病理切片显示赶黄草泡腾片各剂量组可改善肝细胞形态,减少细胞炎性浸润。结论:制备研究结果表明该工艺简单、高效、稳定,制备的赶黄草泡腾片外观完整光滑,口感舒适,符合2020版《中国药典》制剂通则下对泡腾片的各项考察要求,并且具有较好的质量稳定性。药理作用研究结果表明赶黄草泡腾片对CCl4诱导小鼠急性肝损伤和急性酒精性肝损伤具有很好的保护作用。通过本研究为赶黄草泡腾片的生产研发提供了实际的指导意义,为赶黄草的深度研究、开发提供了方向。