【摘 要】
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本研究以羊草与灰色赖草杂种F为试验材料。通过研究杂种F外植体的处理、离体幼穗愈伤组织诱导培养、细胞悬浮培养、继代分化培养的最佳激素配比，建立了组织细胞再生体系；通过秋水仙素和氟乐灵处理愈伤组织、悬浮细胞(团)的染色体加倍研究，探讨了不同诱变剂在不同时间和不同浓度下的加倍效果。主要结果如下：(1)以羊草与灰色赖草杂种Fl幼穗为外植体诱导愈伤组织时，将外植体切碎后培养，不仅有利于愈伤组织的产生，同时可
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本研究以羊草与灰色赖草杂种F<,1>为试验材料。通过研究杂种F<,1>外植体的处理、离体幼穗愈伤组织诱导培养、细胞悬浮培养、继代分化培养的最佳激素配比，建立了组织细胞再生体系；通过秋水仙素和氟乐灵处理愈伤组织、悬浮细胞(团)的染色体加倍研究，探讨了不同诱变剂在不同时间和不同浓度下的加倍效果。主要结果如下：
(1)以羊草与灰色赖草杂种Fl幼穗为外植体诱导愈伤组织时，将外植体切碎后培养，不仅有利于愈伤组织的产生，同时可以缩短出愈时间，提高试验效率。
(2)杂种F<,1>幼穗接在2mg/L2,4-D+MS诱导培养基上诱导的愈伤组织具有较强的胚性，分化再生能力强。同时无附加激素MS分化培养基可以建立高效的再生体系，是最佳的激素组合。
(3)3mg/L2，4-D+MS的培养基诱导的愈伤组织结构紧密、结合松散、易碎，颗粒状的。通过试验表明，这样的愈伤组织适于进行液体振荡培养。
(4)羊草与灰色赖草杂种F<,1>悬浮细胞培养时，蔗糖的含量以4％为宜。建立悬浮细胞系时，愈伤组织从固体转入液体培养基的过渡阶段是关键，继代时每次析出少量(原1/3左右)的原培养基，这样有利于悬浮细胞快速生长，充实细胞内含物。否则对细胞的生长不利。
(5)细胞悬浮培养时，1.0mg/L2，4-D+0.1mg/LKT+4％蔗糖+MS的液体培养基是最佳的激素组合，悬浮细胞分化时，1.0mg/LNAA+0.5mg/LKT+MS分化效果最好。
(6)液体悬浮培养获得的细胞(团)可作为染色体加倍的良好材料，从加倍效果和经济上考虑，氟乐灵可用于羊草与灰色赖草杂种F<,1>染色体加倍的进一步研究。
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