【摘 要】
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为了提高大豆花粉管通道法转基因效率，研究直接用农杆菌转化方法的可行性，以秋大豆品种上海本地青为受体材料，用花粉管通道法在三种CaCl2浓度水平下进行质粒pCAMBIA3301 转化，又以GV3101、LBA4404、EHA105三种农杆菌菌株直接导入花粉管通道为处理进行了遗传转化。以质粒为外源基因平均结实率为36.83％，T0代种子平均成活率为60.89％，T1植株喷施除草剂后平均存活率为8.24
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为了提高大豆花粉管通道法转基因效率，研究直接用农杆菌转化方法的可行性，以秋大豆品种上海本地青为受体材料，用花粉管通道法在三种CaCl2浓度水平下进行质粒pCAMBIA3301 转化，又以GV3101、LBA4404、EHA105三种农杆菌菌株直接导入花粉管通道为处理进行了遗传转化。以质粒为外源基因平均结实率为36.83％，T0代种子平均成活率为60.89％，T1植株喷施除草剂后平均存活率为8.24％。以农杆菌直接转化平均结实率为15.92％，T0代种子平均成活率为20.40％，T1植株喷施除草剂后平均存活率为7.79％。对存活的植株提取DNA进行PCR检测，以质粒为外源基因的处理共获得20株转化苗，三种CaCl2浓度水平的转化效率分别为0.56％、1.64％、1.40％，有两种水平的转化效率约为传统转化效率的三倍。以农杆菌直接转化的处理共获得5株转化苗，转化效率分别为0.17％、0.33％、0.29％。对获得的第T1代种子用除草剂进行选择处理和对转化苗进行PCR检测表明，利用花粉管通道法可以得到预期的目的基因片段，初步表示外源基因已经整合进大豆中。
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