【摘 要】
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目的:观察CXCL13对RANKL在骨性关节炎滑膜细胞中的表达的影响,探讨两者在骨性关节炎滑膜细胞中的相关性。方法:第一部分实验利用TNF-α处理正常关节滑膜细胞,应用免疫荧光检
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目的:观察CXCL13对RANKL在骨性关节炎滑膜细胞中的表达的影响,探讨两者在骨性关节炎滑膜细胞中的相关性。方法:第一部分实验利用TNF-α处理正常关节滑膜细胞,应用免疫荧光检测滑膜细胞中CXCL13的表达;第二部分实验使用CXCL13处理骨性关节炎滑膜细胞,运用蛋白免疫印迹分析方法检测经过CXCL13(不同浓度、不同时间)处理后的骨性关节炎滑膜细胞中RANKL蛋白的表达。结果:1.免疫荧光结果显示CXCL13在骨性关节炎滑膜细胞中表达明显低于正常人的滑膜细胞。2.利用TNF-α(浓度10ug/L)处理正常关节滑膜细胞,随着作用时间的延长CXC113表达呈现减弱趋势。3.蛋白免疫印记检测结果显示:在骨性关节炎滑膜细胞中RANKL蛋白的表达量明显高于正常人滑膜细胞;经TNF-α(浓度为10ng/ml)处理24h后,更换含有CXCL13(浓度25ng/ml)的培养液继续培养1h、3h、6h、24h后,发现在骨性关节炎滑膜细胞中RANKL蛋白表达水平随着时间的延长而降低。经TNF-α(浓度10ng/ml)处理24h后,在更换含有不同浓度的趋化因子CXCL13(Ong/ml、5ng/ml、15ng/ml、25ng/ml)培养液继续处理24h后,RANKL蛋白的表达量随着浓度的增加而降低。在骨性关节炎滑膜细胞中RANKL的蛋白表达量随着CXC113刺激浓度的增加及作用时间的延长,呈现时间依赖性及浓度依赖性降低。结论:CXCL13在一定浓度和时间能够对RANKL表达进行抑制,从而可能通过这一途径进一步延缓骨性关节炎症的炎症进展、骨质破坏、软骨硬化等症状。
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