粘小奥德蘑发酵产物中活性成分的初步研究

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高等真菌中含有丰富的药用和农用活性成分,因此真菌的研究日益引起人们的重视,已成为探索和发掘新药的重要领域。本文以微生物发酵学、植物化学和现代化学分离理论为基础,在对发酵液及菌丝体提取物进行抑菌活性检测的前提下,对活性较好的菌丝体乙酸乙酯萃取物的化学成分进行了分离纯化并得到了结构鉴定。研究结果如下:采用滤纸片法和固体稀释法对粘小奥德蘑发酵液的乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行了抑菌活性测定试验。结果表明,乙酸乙酯萃取物对枯草芽孢杆菌和马铃薯芽孢杆菌表现出良好的抑菌活性;正丁醇萃取物对蜡状芽孢杆菌表现出较好的抑菌活性;萃余浸膏仅对大肠杆菌和产气肠杆菌表现出较弱的抑制活性。随着浓度降低,乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物的抑菌活性明显下降,萃余浸膏几乎无活性。粘小奥德蘑发酵液对细菌并无显著的抑制效果。粘小奥德蘑发酵液对真菌表现出良好的抑菌效果,尤其乙酸乙酯萃取物对植物病原菌的抑制作用更为显著。乙酸乙酯萃取物对烟草赤星病菌、葡萄炭疽病菌、番茄黑霉病菌、白菜黑斑病菌和小麦赤霉病菌这5种植物病原菌均有明显的抑制作用,对白菜黑斑病菌、烟草赤星病菌、葡萄炭疽病菌的最低抑菌浓度(MIC)为10 mg/mL,对小麦赤霉病菌、番茄黑霉病菌的最低抑菌浓度(MIC)为5mg/mL。乙酸乙酯萃取物对小麦赤霉病菌和番茄黑霉病菌的抑菌效果强于白菜黑斑病菌、烟草赤星病菌和葡萄炭疽病菌。对经过常压硅胶柱层析分离后的菌丝体D2部分进行了GC-MS分析。结果表明,粘小奥德蘑菌丝体中含有7种脂肪酸,饱和脂肪酸含量较高,占总含量的79.44%,其中月桂酸C12:0占25.74%,豆蔻酸C14:0占5.31%,棕榈酸C16:0占39.48%,硬脂酸C18:0占6.6%;不饱和脂肪酸的含量仅为20.56%,其中亚油酸C18:2和亚麻酸C18:3占5.33%,油酸C18:1占15.23%。菌丝体乙酸乙酯萃取物采用硅胶柱层析分离,Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱纯化,最终得到3个化合物,并进行了结构鉴定。经理化性质和有机波谱鉴定(MS、1H NMR、13C NMR和DEPT),以及经与标准化合物对照,最终确定化合物X-1为4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮麦角甾烷、化合物X-2为5α,8α-过氧化麦角甾醇、化合物X-3为六氢吡咯[1,2-α]吡嗪-1,4-二酮。
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