载顺铂间充质干细胞外泌体对上皮性卵巢癌生长抑制的体外研究

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背景和目的:上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)是极度危害女性健康的恶性肿瘤之一。在我国目前的临床治疗中,传统化学药物治疗方案是最常见的辅助治疗选择。但是临床现状表明,应用铂类化疗药物治疗EOC具有两大明显的弊端:药物毒副作用和肿瘤耐药性问题。这些问题影响了正常治疗的积极效果,使患者无法得到最佳的治疗收益。在过去近十年的研究中,间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)外泌体(Exosomes)被发现是一种全新且安全的的癌症治疗药物载体,它可以和传统治疗手段进行结合,在癌症治疗中表现出良好的作用。本研究的目的是将顺铂(Cisplatin,DDP)与外泌体结合制备一种新型纳米药物,观察其对EOC细胞株A2780的生长影响,研究载顺铂外泌体的抗癌效果。方法:首先从脐带组织中分离和培养MSCs,并从MSCs的无血清细胞上清中收集外泌体。之后通过超声技术将顺铂装载到外泌体,采用透射电子显微镜、蛋白免疫印迹法、纳米粒子跟踪分析和激光共聚焦显微镜对载药后的外泌体的结构和功能进行评价。超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱仪分析外泌体的载药率。最后,用载顺铂外泌体处理EOC细胞株A2780,收集细胞进行细胞毒性试验、细胞增殖试验、细胞凋亡试验、Transwell侵袭试验和划痕试验,评估载药外泌体对EOC细胞在体外细胞增殖、迁移、侵袭等肿瘤生长指标影响。结果:经超声处理后外泌体的结构和功能并未改变,且载药率可达9.29%。EOC细胞株A2780细胞经药物处理后,在细胞毒性结果相似的情况下,单用顺铂浓度与载药外泌体中顺铂的浓度比为67.33。载顺铂外泌体有效抑制癌细胞活力、增殖,并诱导癌细胞凋亡。同时,在癌细胞侵袭和迁移方面,载顺铂外泌体也有良好表现可以有效发挥抑制作用。结论:体外研究证实顺铂可成功被载入外泌体中并发挥抗卵巢癌作用,载顺铂外泌体大大降低了顺铂的使用剂量,这种优势预示着未来在临床上有望通过降低铂类药物的使用剂量,从而改善药物毒副作用并解决铂耐药等问题。
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