活血软坚方对兔颈脊髓慢性受压纤维化胶原纤维酸性蛋白表达的影响

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目的:观察活血软坚方对慢性受压后的兔颈脊髓神经细胞、神经元微环境改变的影响,评价其抗纤维化的作用。  方法:取2.5kg左右新西兰大白兔120只,查随机数字表随机选取90只,采用蔡钦林介绍的动物模型造模,完成后将模型随机分为:活血软坚方组、活血方组、造模对照组,每组28只;另外30只为空白对照组。造模完成后第三天开始喂服药物,分别为:活血软坚中药、活血中药、生理盐水、生理盐水,时间5周。停药后第2天取标本。随机选取活血软坚方组、活血方组、造模对照组、空白对照组兔子各10只。麻醉后开胸,以升主动脉灌注处死,取出整段脊髓,放入2.5%戊二醛磷酸缓冲液固定,截取损伤邻近段分别切片作HE染色、免疫组化染色。实验所得的图像资料通过病理图像分析系统分析获得四组兔子损伤邻近段颈脊髓单位面积内神经元数量、面积;通过imagepro plus系统分析获得受压点邻近段颈脊髓单位面积内NF200和GFAP阳性表达率,然后进行统计学分析。  结果:(1)单位面积内神经细胞数量、面积(χ±s)比较:①活血软坚方组:数量(7.760±1.568)、面积(1576.473±269.840),②活血方组:数量(6.380±0.565)、面积(1268.792±128.374),③造模对照组:数量(3.890±0.378)、面积(986.454±48.611),④空白对照组:数量(9.000±1.261)、面积(1659.432±154.558)。各组间对比差异均有统计学意义(P<0.05);活血软坚方组神经元数量多于活血方组,两者均多于造模对照组少于空白对照组;活血软坚方组神经元面积大于活血方组,两者均大于造模对照组小于空白对照组。(2)单位面积内 NF200阳性表达率(χ±s)比较:①活血软坚方组(0.380±0.021),②活血方组(0.311±0.066),③造模对照组(0.275±0.024),④空白对照组(0.228±0.016)。各组间对比均有显著差异(P<0.05);活血软坚方组高于活血方组,两者均高于造模对照组和空白对照组,造模对照组高于空白对照组。(3)单位面积内星形胶质细胞GFAP阳性表达率(χ±s)比较:①活血软坚方组(0.401±0.023),②活血方组(0.439±0.031),③造模对照组(0.539±0.034),④空白对照组(0.366±0.039)。各组间对比差异均有显著性(P<0.05);活血软坚方组低于活血方组,两者均低于造模对照组,均高于空白对照组。  结论:(1)活血软坚方与活血方均能促进神经元细胞合成 NF200,进而对神经细胞再生产生积极的作用,但活血软坚方的作用更为明显;(2)活血软坚方与活血方能够抑制星形胶质细胞过度表达GFAP,且活血软坚方的抑制作用强于活血方。(3)活血软坚方和活血方对兔颈脊髓慢性受压后的神经恢复均有效果,但活血软坚方效果较活血方更好。
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