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目的:卵巢恶性肿瘤的浸润和转移是造成女性病人死亡的重要原因之一,为揭示恶性肿瘤浸润转移的机制,本研究通过对卵巢上皮肿瘤组织中骨桥蛋白(OPN)及CA125的表达检测,探讨OPN及CA125蛋白在卵巢上皮肿瘤生长、浸润、转移过程中的作用及相互关系,为卵巢上皮肿瘤的生物学行为、诊断及中晚期卵巢癌的生物学治疗提供理论依据。
方法:
1.研究对象从2002年1月至2006年6月在本院手术治疗的卵巢肿瘤患者的存档组织蜡块中,抽取卵巢癌组织标本60例(浆液性囊腺癌30例,黏液性囊腺癌30例;高分化16例,中分化14例,低分化30例;Ⅰ期12例,Ⅱ期14例,Ⅲ期22例,Ⅳ期12例)。交界性卵巢肿瘤21例(交界性浆液性囊腺瘤9例,交界性粘液性囊腺瘤12例)。卵巢良性肿瘤25例(浆液性囊腺瘤13例,粘液性囊腺瘤12例)。正常卵巢组织10例(来源于因绝经后子宫肌瘤行子宫和双附件切除术)。以上标本均经病理检验证实,标本经10%甲醛液固定,石蜡包埋后存档,纳入研究时,所有蜡块重新切片,并由病理学家复核证实。
2.试剂鼠抗人单克隆OPN抗体,购于美国的 Neorrmrkers公司,及鼠抗人单克隆CA125抗体,购于美国的Neomarkers公司(抗体工作浓度均为1:100)。
3.实验方法采用免疫组织化学SP(9000)方法检测正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、交界性卵巢上皮肿瘤、卵巢癌组织中OPN及CA125的表达。
4.结果判定观察切片中免疫组化染色情况,OPN的染色以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性,CA125的染色主要位于细胞膜,也可表达于细胞浆和腺腔缘,以出现棕黄色颗粒为阳性。结果评定采用AB值法,A:按显色细胞百分比评分阳性细胞数<5%为0分,5%-30%为1分,30%-60%为2分,60%-100%为3分;B:按细胞显色深浅评分:细胞未着色即为0分,浅黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分,每例标本最终评分=A×B(即按显色细胞百分比评分和按细胞显色深浅评分相乘),将最终评分分类:0分、1-2分、3-4分、6-9分分别定为OPN及CA125表达阴性(-)、弱阳性(+)、阳性(++)、强阳性(+++),分别表示不表达、弱表达、中度表达和强表达。
5.统计学处理:采用秩和检验和Spearman等级相关分析,检验水准α=0.05;应用SPSS11.0软件进行分析。
结论:
1.OPN的表达在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、交界性卵巢上皮肿瘤、不同分期卵巢癌组织中的表达逐渐增加,高分化卵巢癌、中分化卵巢癌、低分化卵巢癌OPN的阳性表达率逐渐升高,有淋巴结转移病例的OPN阳性表达升高,均提示OPN的表达在卵巢肿瘤发生发展中起重要作用,并与卵巢恶性肿瘤的侵袭转移有关。
2.CA125的表达在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、交界性卵巢上皮肿瘤、不同分期卵巢癌组织中的表达逐渐增加,高分化卵巢癌、中分化卵巢癌、低分化卵巢癌OPN的阳性表达率逐渐升高,有淋巴结转移病例的阳性表达升高,腹水中有癌细胞病例CA125阳性表达升高,均提示CA125的高表达是卵巢肿瘤的高度恶性及淋巴转移的标志。
3.CA125蛋白及OPN用来鉴别良恶性卵巢肿瘤有重要意义。
4.交界性浆液性囊腺瘤和交界性粘液性囊腺瘤中OPN的阳性表达明显高于正常卵巢组织,但低于不同分期的卵巢上皮癌组织,由此推测OPN 有可能作为一种免疫指标提高快速冰冻切片诊断的准确率,并达到早期诊断和筛选高危患者的目的。作为一个重要的肿瘤转移基因,其在肿瘤基因治疗中具有十分广阔的前景。
5.CA125在浆液性卵巢肿瘤中的阳性表达显著高于黏液性卵巢肿瘤,对卵巢肿瘤类型的诊断及鉴别诊断有一定意义,为治疗提供帮助。
6.OPN与CA125的联合检测可提高特异性和阳性预测值,对卵巢癌的诊断有较高价值。