再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞生物学特性及成脂分化异常研究

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再生障碍性贫血(AA)系多种病因引起的造血障碍,导致红骨髓总容量减少,代以脂肪髓,造血衰竭,临床以全血细胞减少为主要表现的一组综合征。骨髓间充质干细胞(MSC)是中胚层起源的原始细胞,是骨髓基质细胞系的干祖细胞,是骨髓微环境的重要组成部分,本研究体外分离和培养AA患者的骨髓MSC,观察其形态,研究其生长特性、表面标志、分化潜能等,进而对AA患者的骨髓造血微环境作进一步的研究。 第一部分研究再生障碍性贫血(AA)患者骨髓间充质干细胞(MSC)生物学特性的改变。取AA患者和对照组骨髓的MSC,测定其生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测其免疫表型,进行纤维母细胞集落形成单位(CFU-F)计数,比较骨髓MSC融合单层对健康人骨髓CFU-GM的生长支持作用,取上述所得的单克隆来源扩增细胞分别向脂肪、成骨、内皮、神经定向诱导。 结果提示,这些细胞呈梭形贴壁生长,CD105、CD44、CD29、Flk-1均阳性,AA组细胞倍增时间长于对照组,CFU-F低于对照组,AA组对健康人骨髓CFU-GM的刺激作用较正常对照组明显减弱。通过我们对AA患者MSC的生物学特性的初步研究,AA的MSC的表型与已知正常成人的MSC一致,并保持多向分化潜能,但其生长明显缓慢,对造血的支持作用较差,存在生长数量缺陷和质量缺陷,可能导致AA的骨髓造血微环境缺陷。 第二部分研究AA患者骨髓脂肪化的原因。骨髓脂肪化是AA骨髓最显著的病理特征,其造血细胞显著减少而取代为大量的脂肪细胞。已证明在体内成骨细胞可能调节造血干祖细胞“龛位”的主要因素,由于MSC是成骨细胞和脂肪细胞共
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