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再生障碍性贫血(AA)系多种病因引起的造血障碍,导致红骨髓总容量减少,代以脂肪髓,造血衰竭,临床以全血细胞减少为主要表现的一组综合征。骨髓间充质干细胞(MSC)是中胚层起源的原始细胞,是骨髓基质细胞系的干祖细胞,是骨髓微环境的重要组成部分,本研究体外分离和培养AA患者的骨髓MSC,观察其形态,研究其生长特性、表面标志、分化潜能等,进而对AA患者的骨髓造血微环境作进一步的研究。 第一部分研究再生障碍性贫血(AA)患者骨髓间充质干细胞(MSC)生物学特性的改变。取AA患者和对照组骨髓的MSC,测定其生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测其免疫表型,进行纤维母细胞集落形成单位(CFU-F)计数,比较骨髓MSC融合单层对健康人骨髓CFU-GM的生长支持作用,取上述所得的单克隆来源扩增细胞分别向脂肪、成骨、内皮、神经定向诱导。 结果提示,这些细胞呈梭形贴壁生长,CD105、CD44、CD29、Flk-1均阳性,AA组细胞倍增时间长于对照组,CFU-F低于对照组,AA组对健康人骨髓CFU-GM的刺激作用较正常对照组明显减弱。通过我们对AA患者MSC的生物学特性的初步研究,AA的MSC的表型与已知正常成人的MSC一致,并保持多向分化潜能,但其生长明显缓慢,对造血的支持作用较差,存在生长数量缺陷和质量缺陷,可能导致AA的骨髓造血微环境缺陷。 第二部分研究AA患者骨髓脂肪化的原因。骨髓脂肪化是AA骨髓最显著的病理特征,其造血细胞显著减少而取代为大量的脂肪细胞。已证明在体内成骨细胞可能调节造血干祖细胞“龛位”的主要因素,由于MSC是成骨细胞和脂肪细胞共