【摘 要】
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研究背景:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一,传统的治疗方法包括手术、放疗、化疗等,这些治疗方式往往会造成严重的不良反应。由于口腔内微生物菌群丰富,不仅影响术后伤口愈合,同时也参与癌症的发生发展。因此,迫切需要开发一种微创或非侵入性的抗菌治疗方法,以实现预期的协同癌症治疗。化学动力治疗(CDT)是最近提出的一种新概念
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研究背景:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一,传统的治疗方法包括手术、放疗、化疗等,这些治疗方式往往会造成严重的不良反应。由于口腔内微生物菌群丰富,不仅影响术后伤口愈合,同时也参与癌症的发生发展。因此,迫切需要开发一种微创或非侵入性的抗菌治疗方法,以实现预期的协同癌症治疗。化学动力治疗(CDT)是最近提出的一种新概念癌症治疗方法,它的治疗机制和肿瘤微环境(TME)密切相关。TME是肿瘤部位不同于正常组织的一个特殊的环境,主要特点有PH偏酸,氧含量低,某些物质的高表达(例如过氧化氢,谷胱甘肽等)。大量文献已报道,这些不同于正常组织的微环境为肿瘤细胞的不断增殖和转移提供了必要的养分和条件,同时,这些特点也为肿瘤治疗的可选择性和增强一些治疗手段的效果提供重要参考。CDT的原理是含铁试剂利用Fenton或Fenton样反应分解肿瘤环境内源性H2O2,选择性提高肿瘤内·OH浓度,诱导细胞凋亡或死亡,从而实现抗肿瘤。然而,由于CDT自身的一些局限性,未能达到理想的治疗效果。研究目的:本文旨在研究一种新的纳米材料二磷化钼纳米棒(MoP2 NRs),其具有过氧化氢酶样活性和光热性能,在近红外光(NIR)照射后,催化肿瘤部位H2O2产生高浓度·OH,能够显著改善CDT性能。实验方法:首先是材料的制备与表征,通过高温反应和超声辅助剥落工艺制备MoP2 NRs。通过扫描电镜、透射电镜测试,了解纳米材料的形貌大小。利用扫描电镜进行X射线能谱分析,对MoP2 NRs进行元素定性及定量分析。利用X射线光电子能谱分析,了解MoP2 NRs的元素组成以及元素价态。为了研究MoP2NRs纳米粒子的晶态结构,进行了X射线衍射测试。为了计算MoP2 NRs的消光系数,我们对其进行了电感耦合等离子体原子发射光谱法测试。采用紫外-可见-近红外光谱(UV-vis-NIR)测试MoP2 NRs的光吸收变化。为了测定MoP2 NRs纳米粒子的光热转化性能,记录了在相同样品浓度下使用不同激光功率密度照射下温度变化、相同激光功率密度不同样品浓度照射后温度变化、光热转化效率、光热转化稳定性等测试;用对苯二甲酸(TA)荧光法检测在低浓度H2O2(100μM)中MoP2 NRs的催化活性。最后,探讨了MoP2 NRs对口腔鳞癌的治疗效果及抗菌作用。用SCC9,CAL27细胞建立细胞模型进行细胞毒性试验和一系列体外实验验证MoP2 NRs的生物安全性和对口腔鳞癌细胞抑制效果。用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为细菌模型进行抗菌实验,验证MoP2 NRs对细菌的杀伤作用。建立动物模型观察MoP2 NRs对肿瘤的抑制作用,并研究NRs发挥抗肿瘤的机制。结果:我们成功制备纳米棒状结构MoP2 NRs,该纳米粒子具有较好的粒径一致性、分散稳定性以及生物安全性。MoP2 NRs具有广泛的NIR吸收和良好的光热性能。在808 nm NIR激光照射下,MoP2 NRs作为光敏剂有效捕获光激发带电子和价带空穴,能够增强过氧化物酶样催化活性,催化肿瘤内源性H2O2产生大量·OH,这表明纳米粒子可以通过产生·OH发挥CDT效果。·OH是一种活性氧,相比于活性氧中的H2O2或者超氧阴离子具有更强的氧化破坏能力。高浓度·OH随后破坏肿瘤细胞和细菌中的生物大分子,造成细胞不可逆的损伤,同时实现有效的肿瘤根除和抗感染。体内体外实验均证明激光增强MoP2 NRs协同发挥过氧化物酶催化/温和光热治疗效果。抗肿瘤机制研究表明·OH诱导的线粒体凋亡可能是造成口腔癌细胞死亡的主要信号通路。结论:成功开发一种808 nm激光增强过氧化物酶催化/温和光热疗法的MoP2NRs,能够改善CDT性能,显著提高·OH水平。体外和体内实验均表明,该体系具有良好的治疗效果,且无明显毒副作用。因此,我们的工作提出了一种创新的多功能治疗方式,在口腔癌治疗中显示出独特的优势。
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