p38MAPK在大鼠重症急性胰腺炎发病机制中的作用及吡格列酮对其活性的影响

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目的:探讨p38MAPK信号通路在重症急性胰腺炎大鼠发病机制中的作用,以及吡格列酮对其活性的影响。方法:54只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,体重160-200g,随机分为假手术组(C组)、重症急性胰腺炎模型组(SAP组)和吡格列酮治疗组(P组),每组18只。采用5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)逆行胰胆管内加压注射建立SAP模型。P组大鼠在术前2h腹腔内注射吡格列酮(50mg/kg)。分别于术后3、6、12h 3个时间点采用腹主动脉放血法将大鼠分批处死(每次每组6只),收集血标本和腹水送检血清、腹水淀粉酶;部分血清样本保存于-80OC,以备ELISA检测;观察术后胰腺大体病理改变,并留取胰腺组织分为两部分:第一部分放于4%中性甲醛溶液固定;第二部分立即放入液氮罐内冻存。采用Western blotting检测p38MAPK的活化程度,免疫组化法检测PPARγ蛋白的表达,并观察吡格列酮对上述各指标的影响。结果:1.血清淀粉酶变化:造模后SAP组、P组淀粉酶水平在各时间点均显著升高,与C组比较有统计学性(P<0.01);在6h、12hP组与SAP组比较,淀粉酶含量降低,有统计学意义(P<0.05),2.腹水淀粉酶变化:C组无腹水形成,P组腹水淀粉酶水平在各时间点与SAP组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3.胰腺大体评分变化:与C组相比,SAP组各时间点病理评分均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。P组评分较SAP组下降,在12h差异有统计学意义(P<0.05)。4.胰腺组织学评分:与C组相比,SAP组各时间点均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);P组评分较SAP组下降,在6h、12h差异有统计学意义(P<0.05)。5.血清TNF-α水平变化:造模后SAP组血清TNF-α水平与C组相比,在各时间点均显著升高(P<0.01);P组水平较SAP组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。6.胰腺组织p38MAPK的活化水平:与C组相比,SAP组各时间点p38MAPK活性明显升高(P<0.01);而P组活性较SAP组下降,在3h、6h其降低水平有统计学意义(P<0.05)。7.胰腺组织PPARγ蛋白表达的变化:阳性染色主要位于胰腺腺泡细胞的胞浆内,C组表达较弱,SAP组在术后6h、12h明显增加,与C组比较有统计学差异(P<0.05)。P组蛋白表达虽有上升,但与C组相比,无统计学意义(P>0.05)。结论:在SAP早期阶段p38MAPK信号迅速激活,并维持较长时间,与SAP的发生发展密切相关;吡格列酮可降低p38MAPK的活化程度,减轻炎症反应,发挥对胰腺的保护性作用。
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