艾滋病又称获得性免疫缺陷综合症（Acquired Immunodeficiency Syndrom，AIDS），是由人类免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus，HIV）感染机体引起的致死性疾病。由于艾滋病至今依然严重威胁着人类的生命健康，因此亟待寻找新型抗艾滋病病毒药物。Vpu蛋白是人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）特有的辅助调节蛋白，可促进新生病毒颗粒的释放。近年来研究发现Vpu蛋白可拮抗人内在抗病毒因子Tetherin（THN），这为以Vpu为靶点的药物研究提供了新的设计思路。然而，目前Vpu蛋白的靶向药物筛选方法有限，靶点药物开发仅处于初期阶段。因此，建立一种新的Vpu蛋白靶向药物筛选方法具有重要意义。本课题旨在利用表面等离子体共振（SPR）技术建立一种以Vpu蛋白为靶点的药物筛选方法，在此基础上进行Vpu小分子抑制剂的筛选，并初步探究活性化合物对Vpu功能的影响。本研究首先构建了巴斯德毕赤酵母表达质粒pPICZαA-vphu，并利用酵母系统表达了Vpu蛋白，之后对蛋白进行了纯化。BIAcore实验中将Vpu蛋白以直接偶联或抗His标签抗体捕获偶联的方式固定在BIAcoreT M3000生物传感器的CM5芯片表面，通过THN与Vpu蛋白的结合，验证了偶联蛋白的生物活性。对一系列小分子化合物进行筛选，最终得到了3种与Vpu具有高亲和的小分子化合物，分别编号为KA-H001、KA-H002和KA-H003。细胞实验阶段采用CCK-8法检测了细胞毒性，确定了化合物的实验浓度。并通过荧光观察、蛋白免疫印迹法和实时定量PCR法验证了3种化合物对外源性Vpu蛋白的表达和外源性Vpu降解THN的功能无明显影响。另外，采用MAGI实验发现化合物KA-H001对Vpu依赖的HIV病毒释放具有显著的抑制作用（p<0.005），并且存在抑制HIV病毒的其他作用靶点，如Env包膜或病毒复制的早期。虽然化合物KA-H002和KA-H003也具有一定的抗病毒作用，作用机制需进一步探讨。鉴于以上结果，可将筛选出的化合物KA-H001作为抗HIV靶点药物进行进一步的研究。综上所述，本研究建立的基于SPR技术的Vpu蛋白靶向药物筛选方法可用于抗Vpu小分子抑制剂的筛选，为Vpu蛋白的靶向药物研究提供了可靠的实验数据和新的研究思路。