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第一部分 Aurora-A在原发性上皮性卵巢癌组织中的表达及意义
目的:目前许多研究发现,Aurora-A作为一种具有调节细胞有丝分裂功能的基因,在一些实体肿瘤如乳腺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、膀胱癌和舌癌中出现高表达,并且其表达水平与某些肿瘤的生物学行为有一定的相关性,对某些肿瘤的预后也有一定的预测作用。本研究的目的就是分析Aurora-A基因在原发性上皮性卵巢癌中的表达及其与上皮性卵巢癌临床病理类型、临床手术分期的关系,探讨其临床意义。
结论:Aurora-A基因在原发性上皮性卵巢癌组织和SKOV3细胞中呈高水平表达,并且表达水平与临床手术分期呈负相关,表明Aurora-A的阳性表达可能代表了卵巢癌发病的早期病变,其过度表达可能在卵巢癌的发生和恶性进展中发挥一定作用。
第二部分RNA干扰对Aurora-A在人卵巢癌细胞中表达及细胞增殖的影响
目的:RNA干扰技术是近年来发展起来的一项基因沉默技术,它能特异性抑制内源性或外源性靶基因。这项新技术在医学领域的应用尤其突出,不仅可以应用于基础研究,还有望成为攻克肿瘤、艾滋病等新的治疗方法。尤其小片段RNA(siRNA)在基因治疗方面将有着更为广阔的前景。本研究旨在运用RNA干扰技术抑制卵巢癌细胞株SKOV3中Aurora A基因的表达,观察其对细胞增殖的抑制作用和促进细胞凋亡的作用,探讨RNA干扰技术在抗肿瘤基因治疗方面的应用前景以及沉默SKOV3细胞中AlJrora-A基因表达作为恶性肿瘤治疗靶点的可能性。
结论:1、针对Aurora-A基因的特异性Oligo siRNA成功转染SKOV3细胞后,能够特异性抑制、降解同源的mRNA,有效阻滞Aurora-A的表达,可作为特异性阻断Aurora-A基因表达、评价其功能的良好手段;
2、经RNA干扰技术特异性沉默Aurora-A基因后,能够抑制SKOV3细胞的增殖,促进细胞凋亡,提示Aurora-A可作为卵巢癌治疗的靶基因。
第三部分Aurora-A基因对卵巢癌SKOV3细胞株端粒酶的影响
目的:以往大部分对Aurora-A基因在肿瘤发生发展中作用的研究均集中在其对有丝分裂各阶段的调节作用上,对其在其它方面的研究报道很少。本研究从端粒酶入手,在第二部分研究的基础上,检测了Aurora-A基因对卵巢癌SKOV3细胞株端粒酶催化亚单位hTERT及端粒酶活性的影响,从另一方面探讨Aurora-A基因促进肿瘤细胞发生恶性转化的作用机制
结论:转染针对Aurora-A基因的Oligo siRNA后,SKOV3细胞的端粒酶催化亚单位there mRNA表达降低,端粒酶活性降低,说明Aurora-A基因对卵巢癌端粒酶的活性有一定的调控作用,这可能是Aurora-A基因引起肿瘤恶性转化的另一途径。