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目的本实验采用不同浓度瘦素作用于新生SD大鼠心肌细胞,研究瘦素对JAK/STAT信号传导通路及心肌局部RAS的影响,探讨瘦素诱导心肌肥厚可能的致病机制,为心肌肥厚的预防、治疗提供新的思路和新的方法。方法原代培养新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞,将细胞随机分组,分别给予下列药物干预:①瘦素干预部分:A组:空白对照;B组:加入瘦素10ng/ml;C组:加入瘦素100ng/ml;D组:加入瘦素1000ng/ml;②JAK/STAT通路阻断剂AG490干预部分:A1组:空白对照; B1组:加入瘦素100ng/ml;C1组:瘦素100ng/ml +AG490 5umol/L;③缬沙坦干预部分:A2组:空白对照;B2组:加入瘦素100ng/ml;C2组:瘦素100ng/ml +缬沙坦10-6mol/L;D2组:瘦素100ng/ml +缬沙坦10-5mol/L;E2组:瘦素100ng/ml +缬沙坦10-4mol/L。采用考马斯亮蓝法测定细胞总蛋白含量;RT-PCR检测心肌肌球蛋白重链β-MHC、血管紧张素原、AT1受体mRNA表达;Western-Blot检测Stat3磷酸化蛋白。结果1.瘦素随浓度增加β-MHC mRNA表达呈递增趋势,其中B、A组β-MHC mRNA表达无统计学差异(P﹥0.05),C、D组β-MHC mRNA表达显著高于A组及B组(P﹤0.01),C、D组间无统计学差异(P﹥0.05);瘦素呈剂量依赖性增加心肌细胞蛋白含量,且三个不同浓度组间相比均有显著性差异(均P﹤0.01);JAK/STAT通路阻断剂AG490可显著降低β-MHC mRNA表达及心肌蛋白含量(P﹤0.01)。2.瘦素呈剂量依赖性增加Stat3磷酸化蛋白含量;JAK/STAT通路阻断剂AG490使Stat3磷酸化蛋白明显降低,B1组显著高于A1组(P﹤0.01);C1、A1组比无统计学差异(P﹥0.05)。3.瘦素呈剂量依赖性增加AT1-R mRNA及血管紧张素原mRNA表达(P﹤0.01)。JAK/STAT通路阻断剂AG490组AT1-R mRNA和血管紧张素原mRNA的表达显著降低(P﹤0.01),但C1、A1组比有统计学意义(P﹤0.01)。4.缬沙坦对心肌蛋白含量随缬沙坦剂量递增而出现递减趋势,C2、D2、E2组与B2组、A2组比较均有显著差异(P﹤0.01);B2组心肌细胞β-MHC mRNA表达显著高于A2组(P﹤0.01),C2、D2、E2组与A2组比较均有显著差异(P﹤0.01),C2组与B2组比无统计学差异(P﹥0.05);D2、E2组与B2组比有显著差异(P﹤0.01);D2组与E2组比有统计学意义(P﹤0.01)。结论1.瘦素呈剂量依赖性诱导新生SD大鼠心肌肥大,检测瘦素水平可判断心肌肥厚程度,从而可作为诊断心肌肥厚有效指标及治疗心肌肥厚的敏感指标。2 .瘦素可通过JAK/STAT信号途径引起心肌肥大,认为激活JAK/STAT信号途径是瘦素引起心肌肥厚的机制,为研究瘦素诱导心肌肥厚的致病机制提供实验依据。3.瘦素通过JAK/STAT信号途径引起心肌局部RAS的激活,但由于不能完全抑制RAS,推测心肌RAS的激活还存在其它机制,RAS的激活是JAK-STAT途径引起心肌肥大的下游机制之一,参与了瘦素促进心肌肥厚的致病过程。4.AT1受体阻断剂缬沙坦能显著抑制心肌肥大,但不能完全逆转其肥大作用。故缬沙坦可能作为逆转肥胖相关的心肌肥厚的辅助用药应用到临床工作中,为心肌肥厚的预防、治疗提供新的思路和新的方法。