乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。约50%原发性乳腺癌的发生与雌激素有关,因此,雌激素受体在乳腺癌的发生、发展和治疗中具有十分重要的地位。雌激素受体亚型ERβ的发现让人们相信很多单独用ERα表达难以解释的现象将有新的突破。乳腺癌他莫昔芬治疗耐药的问题一直难以解决,而关于ERβ与乳腺癌雌激素的依赖关系尚不明确,相关报道结果有很大矛盾。因此,本研究通过比较ERβ表达和临床病理以及生物学指标间的关系,了解乳腺癌ERβ表达的临床意义,同时采用临床配对研究和体外实验研究两部分内容初步探讨乳腺癌ERβ表达和他莫昔芬内分泌治疗耐药的关系。一、乳腺癌ERβ表达与临床病理参数及预后标志物的关系目的探讨雌激素受体亚型ERβ在乳腺组织中的表达及其与其他生物学预后标志物以及和临床病理参数的关系。方法采用组织芯片和免疫组化技术比较109例原发性乳腺癌患者中ERβ表达与ER、PR、p53、Her2/neu、Ki-67以及和临床病理参数的关系。结果在乳腺癌中62.6 %ERβ表达阳性,统计学分析发现ERβ表达和临床分期正相关,和Ki-67表达负相关。ERβ表达和ERα、PR、HER-2/neu、p53以及其他组织病理学参数无明显相关性。结论在乳腺癌癌变进展中伴随ERβ蛋白的表达缺失,说明ERβ可能是乳腺癌重要的预后指标及治疗靶点。二、乳腺癌ERβ表达和内分泌治疗关系的临床研究目的探讨ERβ及其剪切变异体表达与乳腺癌他莫昔芬治疗耐药的关系。方法选取接受他莫昔芬治疗期间出现疾病进展的13例病例作为他莫昔芬抵抗组,另外选取在年龄、绝经状态、随访时间、肿瘤分级分期和组织学表现上均接近,但是接受他莫昔芬治疗期间未出现疾病进展的同样13例患者作为他莫昔芬敏感组。采用免疫组化方法检测总ERβ、ERβ1和ERβcx蛋白的表达。结果总ERβ表达在他莫昔芬抵抗组和敏感组之间有显著性差异(P <0.05),总ERβ蛋白水平在他莫昔芬敏感组明显高于他莫昔芬抵抗组。ERβ1和ERβcx蛋白表达水平在两组间没有显著性差异。结论ERβ蛋白表达可能和乳腺癌他莫昔芬治疗敏感有关,在此过程中ERβ各种剪切变异体的可能作用及机制仍需进一步扩大病例深入研究。三、ERβ表达和内分泌治疗关系的实验研究目的研究在不同处理因子作用下,外源基因ERβ的表达对MCF-7乳腺癌细胞系生长特性的影响。方法利用脂质体转染方法将ERβ真核表达载体pBI-EGFPERβ导入MCF-7乳腺癌细胞系。采用Western blot方法,检测转染细胞中ERβ的蛋白表达水平,筛选阳性克隆。以亲本细胞MCF-7为对照,在雌激素E2和雌激素受体拮抗剂他莫昔芬作用下观察细胞的生长特点。结果在转染ERβ基因的MCF-7细胞系中, Western blot检测证实ERβ的蛋白表达水平显著增高。在无处理因子情况下,外源基因ERβ在MCF-7细胞系中的表达抑制细胞生长。与亲本细胞MCF-7细胞相比,转染ERβ的MCF-7细胞对雌激素的敏感性下降,但对他莫昔芬处理的敏感性无明显减少。结论外源性ERβ基因在MCF-7乳腺癌细胞中的稳定表达不增加对他莫昔芬的耐药性,但使之对雌激素的敏感性下降。