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目的：
观察睾酮(testosterone，T)对体外培养的人外周血内皮祖细胞（peripheral-blood-derived endothelial progenitor cells，PB-EPCs）增殖和迁移能力的影响，并探讨其可能机制。旨在通过探讨雄激素对内皮祖细胞成血管能力的影响，研究雄激素在保护男性心血管系统中的可能机制。
方法：
(1)外周血EPCs的分离、培养和鉴定:取健康男性志愿者外周血（每份20mL，肝素抗凝），采用密度梯度离心法获得单个核细胞(Mononuclear cells，MNCs)，经EGM-2MV培养基重悬、计数2-5×106/ml接种至已用人纤维连接蛋白包被的培养板中，于（37℃、5％CO2、饱和湿度）培养箱中孵育。培养至第7天，取贴壁细胞进行鉴定:
①倒置显微镜下观察细胞形态，并摄片;
②多波长激光共聚焦显微镜观察FITC标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-I)和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-ac-LDL)双染色阳性为正在分化的EPCs;
③流式细胞仪检测其表面标志CD133、VEGFR-2、CD34、CD14的表达。
(2)实验分为六组:第1、2、3、4组分别加入0、1、10、100 nmol/L睾酮;第5组加入10 nmol/L的雄激素受体阻断剂氟他胺(Flutamide，F)干预3h后，再加10 nmol/L睾酮;第6组加入40μmol/L的磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylino-sitol-3-kinase，PI3K)阻断剂LY294002干预1h后，再加10 nmol/L睾酮;培养箱中孵育。
(3)培养48h，二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力，Transwell小室检测各组细胞的迁移能力。实时荧光定量PCR检测各组细胞血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)mRNA的表达变化，ELISA法检测各组细胞VEGF分泌量的变化。
结果：
睾酮干预组细胞的增殖能力、迁移能力，VEGF mRNA和蛋白的表达与对照组相比明显增高，且呈现一定的浓度依赖性，差异有统计学意义(P＜0.05);加入氟他胺和LY294002干预组细胞的增殖能力、迁移能力，VEGF mRNA和蛋白的表达与同浓度睾酮组相比明显下降，差异有统计学意义(P＜0.05)，雄激素受体阻断剂和PI3K阻断剂可以阻断睾酮上调EPCs增殖能力、迁移能力、VEGFmRNA和蛋白表达的作用。
结论：
睾酮呈一定的浓度依赖性促进EPCs的增殖、迁移以及VEGF的表达，该作用主要是通过雄激素受体途径实现的，其中PI3K/Akt信号通路参与调控了此过程。