结肠癌的发生发展与肠道微生物密切相关。研究表明魏斯氏菌在结肠癌患者粪便中丰度降低。Weissellaconfusa菌是魏斯氏菌的一种,是人体常驻菌,具有抑制病原菌、抗氧化、产生大量胞外多糖等潜在益生特性。乳酸菌胞外多糖（EPS）具有抗氧化、免疫调节、降低胆固醇和抗癌等多种特性,Weissellaconfusa胞外多糖直到近几年才开始有研究,主要作为增稠剂、稳定剂、乳化剂应用在饲料、食品等工业中,对人体健康的益处尤其是抗肿瘤活性研究仍有待深入,抗肿瘤机制尚无定论。目的通过结肠癌细胞模型和异种移植瘤模型探索Weissellaconfusa J4-1 EPS的体内体外抗结肠癌活性并初步研究抗癌机制。方法（1）改良MRS培养基使W.confusa J4-1大量产生胞外多糖,除蛋白、醇沉、透析和冻干得到EPS冻干品。通过红外光谱、紫外光谱、高效液相和扫描电镜表征该样品。（2）以SW480和HT29两种结肠癌细胞系为细胞模型,通过CCK8法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞仪检测周期与凋亡等方法评估该胞外多糖的体外抗结肠癌作用。（3）构建异种移植瘤裸鼠模型,EPS经瘤内注射给药,评估该胞外多糖的体内抗肿瘤作用。（4）通过实时荧光定量PCR检测Fas、Fasl、Bax、细胞色素C、Bc12、BAD、Caspase3、Caspase8、Caspase9、Caspase10、TLR 等凋亡相关基因的表达,初步探索可能的抗肿瘤机制。（5）每个实验重复 3 次。采用 GraphPad Prism 8 和 IBM SPSS Statistics 26作图和分析。P＜0.05被认为有统计学意义。结果（1）本研究筛选的Weissellaconfusa J4-1在改良MRS培养基上呈现为粘液状菌落,利用蔗糖在30℃条件下培养72h可产生大量胞外多糖,冻干样品产量约25.354g/L,样品中总胞外多糖含量达83.71%。（2）该多糖不含蛋白质、葡萄糖是主要单糖、可能存在硫酸基团和氨基或胺基取代基,具有表面光滑的紧凑的片层状结构。（3）该胞外多糖在工作浓度0.8mg/ml时可抑制结肠癌细胞SW480和HT29的增殖,但对正常结肠上皮细胞NCM460无明显毒性。EPS诱导HT29细胞凋亡并将细胞阻滞在G0/G1期,对SW480无促凋亡作用,但有显著的G1/S期阻滞,使细胞周期停滞在G0/G1期,能抑制SW480和HT29的迁移和侵袭能力。（4）动物模型中也观察到了 EPS的抗结肠癌作用,低剂量组EPS总给药量为5.02mg,高剂量EPS组给药量共6.7mg。两组实验组较对照组显著抑制肿瘤生长,高剂量EPS组在给药2次显著抑制肿瘤生长。（5）EPS抗结肠癌细胞HT29的转录水平分析发现Bax、细胞色素C、Bc12、BAD、Caspase9等线粒体途径的重要基因与对照组相比无明显差异,Fas、Fasl、Caspase3、Caspase8、Caspase10等死亡受体通路的关键基因表达上调。TLR2和TLR4基因表达上调。结论（1）本研究中W.confusa J4-1菌株可以产生胞外多糖,是含有非碳水化合物部分修饰的葡聚糖。（2）W.confusa J4-l EPS在体内体外均表现出抗结肠癌作用。（3）W.confusa J4-1 EPS毒性小,安全性高。（4）W.confusa J4-1 EPS抗结肠癌不是线粒体途径介导的,可能是通过上调Fas和Fasl,上调TLR2,抑制结肠癌细胞HT29发挥抗肿瘤作用。