鸡毒支原体耐药性分析及其结构蛋白抗原性变异研究

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鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum,MG)是一种引起鸡、火鸡的慢性呼吸道病的病原体,临床上主要采用抗菌药物防治和疫苗接种来控制MG感染。但随着抗菌药物的广泛使用,耐药菌株普遍存在,本研究对分离自广东、四川、北京等地方临床株进行了耐药性调查;应用SDS-PAGE分析鸡毒支原体结构蛋白及抗原性的异同和特点;应用Western-Blot分析MG各株结构蛋白的抗原性,寻找共同的抗原成分,为建立有效的诊断技术和基因工程疫苗的研制提供理论依据。 1鸡毒支原体的耐药性分析 收集来自不同地区(广东、四川和北京)疑似MG感染病料,分离并鉴定出51株鸡毒支原体;对51株临床鸡毒支原体进行了对六类九种抗菌药物(氨基糖苷类、四环素类、氯霉素类、大环内酯类、林可胺类、氟喹诺酮类)敏感性测定。最小抑菌浓度测定采用试管两倍稀释法,重复三次。结果显示三地区分离的鸡毒支原体对六类抗菌药物呈现不同程度的耐药性,北京地区临床株对林可霉素和庆大霉素耐药率分别是100%和71.4%,广东地区分离株对强力霉素、林可霉素和庆大霉素的耐药率分别是56.5%、100%和52.2%,四川地区分离株对林可霉素、庆大霉素、强力霉素和氟苯尼考的耐药率分别为95%、80%、65%和50%。 2鸡毒支原体结构蛋白SDS-PAGE电泳分析 应用SDS-PAGE对鸡毒支原体标准株、临床株及实验室诱导的耐药鸡毒支原体进行了结构蛋白比较分析。结果显示,所有鸡毒支原体在75KD、55KD、29KD和26KD处都出现了蛋白条带;55KD蛋白表达量的高低与鸡毒支原体对抗菌药物的耐药性呈现一定的正相关,临床株的结构蛋白呈现地区和株间的多样性。 3Western-Blot分析MG的结构蛋白抗原性 制备了3株特异性兔抗MG多克隆抗血清;应用SDS-PAGE及Western-Blot对鸡毒支原体标准株、临床株及实验室诱导的耐药鸡毒支原体进行了结构蛋白抗原性比较分析。结果显示临床株结构蛋白抗原性存在地区和株间的差异。所有菌株与3株抗血清反应均能产生约75KD和55KD印迹条带,显示出较好的免疫原性。
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