七蟾扶正胶囊对SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的影响及其机制研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ryu_sh
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目的:通过建立三批人肝癌SMMC-7721细胞的裸鼠移植瘤模型,观察七蟾扶正胶囊对裸鼠移植性SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响,并研究七蟾扶正胶囊的作用机理。  方法:人肝癌SMMC-7721细胞(4×106/只),接种至BABL/C裸鼠背部皮下,待裸鼠移植瘤体积长至100-200mm3时分组给药,随机分为5组(10只/组),分为对照组,氟尿嘧啶(5-Fu)对照组(ip,25mg·kg-1),七蟾高、中、低剂量(ig,3g·kg-1、1.5g·kg-1、0.75g·kg-1),连续给药20d。给药期间测量移植瘤体积,计算相对肿瘤体积、肿瘤增值率。末次给药后24h,处死取出移植瘤,称量瘤重,计算抑瘤率。以上实验重复三批。取肿瘤组织,固定包埋,做肿瘤组织病理切片,然后HE染色,观察移植瘤组织病理形态。另取肿瘤组织研磨成细胞悬液,进行流式细胞术(FCM)检测,观察裸鼠移植瘤组织细胞周期分布和裸鼠移植瘤细胞凋亡情况。另取肿瘤组织提取组织蛋白,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、Fas、Fasl蛋白的表达情况。  结果:三批实验七蟾各给药组肿瘤体积、相对肿瘤体积、裸鼠瘤重明显小于对照组(P<0.01),其高、中、低剂量组给药末肿瘤增值率分别为40.39%、51.98%、59.21%,肿瘤抑瘤率分别为57.18%、45.45%、32.98%。观察移植瘤组织病理切片,各给药组组织细胞体积变小,在组织中结节中可看到中度的坏死、出血等现象,细胞浆改变,部分癌细胞水变性,核固缩、溶解及细胞崩解,病理性核分裂相减少。流式细胞仪检测七蟾高、中、低剂量组移植瘤组织细胞处于G1期的比例均明显高于对照组的比例(P<0.01);七蟾高、中、低剂量移植瘤组织细胞总凋亡率为64.02、58.30、55.12,明显高于对照组(P<0.01)。Western blot分析显示:七蟾各剂量组与对照组相比能够明显上调移植瘤组织中 Bax、Fas、Fasl蛋白表达,七蟾低剂量对照组相比能够明显下调移植瘤组织中 B cl-2蛋白表达(P<0.05)。  结论:通过实验证明七蟾扶正胶囊具有明显抑制作用,其抑制作用的机理是使组织细胞阻滞在 G1期和诱导移植瘤细胞产生凋亡;其可以上调 Bax、Fas、Fasl蛋白的表达,参与线粒体通路和死亡受体通路而诱导凋亡。
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