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目的:制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒后携带脑神经营养因子(Brai n-derived neurotrophic factor BDNF)基因形成复合物,观察复合物对颅脑有损伤的大鼠的治疗作用。方法:本次实验使用乳化聚合法制作聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PB CA-NPs),用透射电子显微镜分析纳米粒的形态以及粒径。构建真核表达载体PEGFP-BDNF,用Hind III,Sal I酶双酶切以后进行鉴定及测序,然后用PB CA-NPs进行包裹制成PBCA-PEGFP-BDNF。按照随机数字表法将48只雄性SD大鼠分为空白组、PBCA组、PEGFP-BDNF组和PBCA-PEGFP-BDNF组,每组12只。采用自由落体致伤原理制备颅脑损伤大鼠模型后分别注入生理盐水、PBCA纳米粒、质粒PEGFP-BDNF、PBCA-PEGFP-BDNF1 m L。7天后取大鼠右侧大脑创伤周围脑组织100mg,采用RT-PCR检测大鼠脑组织中BDNF m RNA的表达;使用荧光显微镜、Western blotting及免疫组化检测BDNF蛋白在大鼠脑组织中的表达情况;采用Morris水迷宫试验检测PBCA-PEGFP-BDNF对于颅脑损伤大鼠的治疗作用。结果:实验所制得的PBCA-NPs粒径均匀、电动电位较高,DNA负载率为(62.23士2.15)%。采用PBCA-NPs包裹PEGFP-BDNF并转染大鼠后可见BDNF在模型大鼠脑组织内表达增高。RT-PCR的结果显示,4组大鼠BDNF m RNA的表达量差异有统计学意义(F值为112.668,P值为0.000),与前三组相比较,PBCA-PEGFP-BDNF组的BDNF m RNA表达量明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,4组大鼠BDNF蛋白表达差异有统计学意义(F值为66.629,P值为0.000),PEGFP-BDNF组中BDNF蛋白的表达高于前两组,而PBCA-PEGFP-BDNF组中BDNF的表达明显高于前3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PBCA-NPs是一种良好的基因载体,可提高所携带基因进入组织后的表达率及治疗作用。