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目的:建立APOL1（Apolipoprotein L1）基因变异和MYH9（Nonmuscle Myosin Heavy Chain9）基因单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）的检测方法，探讨APOL1基因变异频率以及MYH9基因单核苷酸多态性（SNP）与我国汉族人群高血压肾病的相关性。 方法：经系统化采集、整合患者临床信息，筛选研究对象，调查患者病史，复查血压，检查眼底和/或心超，检测血/尿肌酐和白蛋白、尿白蛋白/肌酐比值，临界者加做肾 B超或穿刺，确认纳入病例组。对照组为来宁波市泌尿肾病医院体检的汉族健康成年人，年龄40岁以上，无原发性高血压病史。所有研究对象均排除恶性肿瘤、内分泌性疾病、糖尿病、心脑血管疾病等。提取病例组和对照组外周血基因组 DNA，于-20℃冰箱保存备用。设计 APOL1基因外显子引物，通过NCBI-Gene检索确认人类APOL1基因序列（NM_145343.2）。采用Primer5.0软件分别设计APOL1基因外显子引物，设计好的引物委托深圳华大基因有限公司合成。扩增APOL1基因，使用2％琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物，将PCR产物纯化后送深圳华大基因有限公司测序，以期发现APOL1基因在病例组和对照组的变异。获取MYH9基因SNPs，通过HapMap数据库查找中国人群的遗传信息，采用Tagger Pairwise法（RSquare cut off=0.8，MAF cut off=0.2）获取MYH9基因所有SNPs信息。用SNP功能注释系统（SNPView系统、SNPper系统等）进行 SNP的功能分析和预测，确定与项目研究对象高度相关的6个待测人类MYH9基因SNPs。设计MYH9基因SNPs引物，通过NCBI-SNP-dbSNP查找6个待测人类MYH9基因SNPs（rs1005570、rs2413396、rs80338826、rs3752462、rs11089788、Rs2269529）对应的基因序列，采用Primer-blast软件分别设计6个MYH9基因SNPs的引物，委托上海祥音生物科技有限公司合成。扩增MYH9基因，鉴定PCR产物，采用酶纯化法纯化目标DNA片段，委托上海祥音生物科技有限公司进行SNaPshot PCR检测。以期发现MYH9基因单核苷酸多态性在病例组和对照组的不同。 结果：经详细的临床诊断和入组标准筛选，确认纳入高血压肾病患者200例，其中男104例，女96例。年龄40～85岁，平均年龄64.4±10.2岁。确认纳入对照组208例，其中男94例，女114例。年龄40～87岁，平均年龄60.2±11.7岁。病例组和对照组在年龄上的差异有统计学意义（P﹤0.001）。检索 APOL1基因发现，APOL1基因序列总共有7个外显子，第一个外显子因为无蛋白质编码功能故不设计引物，第2～6外显子各设计1对引物，第7外显子序列长度为883 bp，为便于检测，设计了2对引物。应用Sanger测序法对APOL1基因进行测序，测序结果经Mutation Surveyor4.0.4软件处理，病例组共检出17例稀有变异，稀有基因变异检出频率8.5%（17/200）。对照组没有稀有变异。病例组和对照组均检出3个SNPs。去除dbSNP中已收录的变异、去除1000 genome和E SP数据库中频率大于1%（显性）或5%（隐性）的变异、去除同义变异之后，利用 MutationTaster（http://www.mutationtaster.org），Polyphen-2（http://genetics. bwh.harvard.edu/pph2）和 SIFT（http://sift.jcvi.org）网站对所有未及报道的错义突变、插入突变、移码框突变等可能影响蛋白功能的变异进行功能预测，发现其中只有2例是第五外显子的稀有变异，可能机制是这2例具有使蛋白质功能缺失的突变（loss of function mutation），而其他稀有变异可能是良性变异，没有致病性。我们应用SNaPshot技术检测MYH9基因6个SNPs，检测结果使用ABI公司的Genemapper4.0软件进行分析，MYH9基因6个SNPs的基因型均检测出来。 结论：本研究应用Sanger测序法对APOL1基因进行测序，病例组共检出17例稀有变异，检出频率8.5%（17/200）。对照组无稀有变异。其中只有2例稀有变异是可能具有使蛋白质功能缺失的突变，且在病例组具有重现性，表明APOL1基因变异可能与高血压肾病相关。APOL1基因的3个SNPs可能与宁波地区汉族人群高血压肾病无关。APOL1基因编码的APOL1蛋白在细胞膜的结构和功能的发展和维持中具有重要作用，会导致对肾脏损伤的易感性。本研究应用SNaPshot技术检测MYH9基因6个SNPs的基因型，MYH9基因突变可引起局部肾小球足突融合，足细胞裂孔膜消失进而损伤肾脏，但是经过统计分析发现 MYH9基因单核苷酸多态性（SNPs）可能与宁波地区汉族人群高血压肾病无关。