【摘 要】
：
本实验室前期研究证明,用同时表达抑制素-乙肝表面抗原和促性腺激素释放抑制激素-乙肝表面抗原的共表达质粒（p IRES-SINH-SRFRP）及其在此基础上引入tPA信号肽所构建的另一种质粒（p IRES-tPA-SINH/tPA-SRFRP）免疫鼠和羊,可促进卵泡发育并提高产仔数,而且证明引入tPA信号肽的基因疫苗免疫效果更好。然而,由于这两种疫苗载体携带的氨苄抗性基因,临床应用存在安全隐患,无法
【基金项目】
：
现代农业技术体系（CARS-37-04B）；
论文部分内容阅读
本实验室前期研究证明,用同时表达抑制素-乙肝表面抗原和促性腺激素释放抑制激素-乙肝表面抗原的共表达质粒（p IRES-SINH-SRFRP）及其在此基础上引入tPA信号肽所构建的另一种质粒（p IRES-tPA-SINH/tPA-SRFRP）免疫鼠和羊,可促进卵泡发育并提高产仔数,而且证明引入tPA信号肽的基因疫苗免疫效果更好。然而,由于这两种疫苗载体携带的氨苄抗性基因,临床应用存在安全隐患,无法直接引入平衡致死系统。因此,本研究利用实验室已有的pVAX-asd载体,将tPASINH和tPA-SRFRP两个基因插入载体中,构建两个非抗性筛选、融合乙肝表面抗原的单表达基因疫苗,并将其分别和联合免疫小鼠,分析免疫效果,旨在获得免疫原性和安全性更优的INH及GnIH基因疫苗。主要研究内容和结果如下:1.非抗性筛选、融合乙肝表面抗原的INH和GnIH基因疫苗的构建及鉴定运用PCR技术扩增获得tPA-SINH、tPA-SRFRP片段,将其插入pVAX-asd载体中,构建pVAX-tPA-SINH-asd和pVAX-tPA-SRFRP-asd两种非抗性筛选基因疫苗,经双酶切和测序鉴定,疫苗构建成功。分别将质粒pVAX-tPA-SINH-asd和pVAX-tPA-SRFRP-asd转染CHO细胞,用RT-PCR扩增,证明两种质粒均能在真核细胞中表达。2.非抗性筛选、融合乙肝表面抗原的INH及GnIH基因疫苗免疫小鼠选取156只体重相近的5周龄昆明雌鼠,分为13组,将pVAX-tPA-SINH-asd和pVAX-tPA-SRFRP-asd疫苗单独及联合免疫（肌肉注射）小鼠;每种疫苗设置高、中、低（分别含50μg、10μg和5μg质粒DNA）三个剂量组,同时设置3个剂量的阴性（pVAX-asd）和空白对照组（生理盐水）。间隔2周加免一次,共加免2次。结果表明,试验组能够诱导小鼠产生免疫反应,且抗体水平随免疫次数的增加而上升。INH免疫中各剂量组的产仔数显著高于其他组,免疫效果最好。GnIH免疫的高、中剂量组产仔数显著高于低剂量组。联合免疫组中低剂量组中产仔数稍高于高、中剂量组。从繁殖结果来说,INH疫苗单独免疫较其它组效果更好（12.89±2.40）。3.非抗性筛选INH及GnIH基因疫苗安全性评价小鼠产仔后采集pVAX-tPA-SINH-asd和pVAX-tPA-SRFRP-asd两种疫苗联合免疫组小鼠的心、肝、脾、肺、肾、大脑、注射部位肌肉、小肠、卵巢9个组织,PCR方法检测未发现质粒DNA整合到小鼠组织基因组中,观察石蜡切片并未发现组织病变,各疫苗组与对照组小鼠组织的脏器指数差异不显著,说明非抗性筛选基因疫苗pVAX-tPA-SINH-asd和pVAX-tPA-SRFRP-asd具有良好的生物安全性。
其他文献
自然界中岩土体的固有性质决定了岩土工程在勘察、设计、施工的过程中与不确定性密不可分,这种不确定性使得确定性分析难以获得较为准确的结果。近几十年来众多学者对岩土参数的不确定性问题进行了研究,提出了包括随机变量模型和随机场模型在内的一些分析方法。本文采用随机场模型结合蒙特卡洛分析方法,对岩土工程中常见的几类问题,如地下洞室收敛变形、地基沉降和隧道开挖最小支护力进行分析,主要研究内容与成果如下:（1）编
目的:本文旨在研究FDFT1在HIV-1 Tat蛋白调控人类疱疹病毒8型复制周期中的作用,明确HIV-1 Tat蛋白是否通过调控FDFT1来参与HHV-8复制周期调控,为阐明FDFT1在艾滋病相关型卡波济肉瘤的发生与发展中的作用提供部分依据。方法:（1）通过包装获取Tat重组慢病毒感染BCBL-1细胞,利用RT-q PCR检测Tat、FDFT1、ORF73、ORF50的m RNA表达,同时通过We
安岳石窟已被列入世界文化遗产后备名录清单,全国重点文物保护共9处。安岳石窟艺术集古、多、精、美为一身,是我国古代雕塑艺术的伟大宝库。璎珞作为菩萨重要的装身饰物,代表了人们对菩萨的敬畏和赞美,寄托了对美好生活的向往,提取和运用璎珞的造型和纹样并运用到现代设计当中,以发挥传统文化的余热。本文通过田野调查的基础上,共考察保存较为完好,规模较大的全国重点文物保护单位共8处,分别是卧佛院、千佛寨、华严洞、圆
近年来,随着抗生素耐药性的广泛传播,现代医学面临着严峻的挑战。超级细菌等多重耐药菌的出现,严重地威胁着全人类的生命健康安全。细菌铁载体因其独特的铁转运功能而广受关注,基于细菌铁载体的“特洛伊木马”抗菌策略可用于发现治疗耐药革兰氏阳性和阴性菌感染的新药。随着模拟天然铁载体抗生素研究的逐渐成熟,该策略成为了研究热点,对研发针对多重耐药菌的新型抗生素的药物设计有着重要的指导意义。Baumannoferr
“文化是旅游的灵魂,旅游是文化的重要载体”,《关于促进文化旅游融合发展的实施意见》中就做了论断,推动文化产业和旅游业的融合发展成为了重要的建设方针和时代趋势。校园文化作为优质的精神食粮和旅游资源,使得校园旅游在“教育热”和“旅游热”的双重作用下成为一种群体性的常态行为。在文旅融合的背景下对校园文化形象设计的研究是从一种新的研究视角,立足于新的社会环境,通过促进校园文化旅游的发展,继而得以通过旅游发
目的:为了探究蔗糖亚砷酸酯对体外培养的BCBL-1细胞增殖、凋亡的作用,同时探索蔗糖亚砷酸酯对BCBL-1细胞胞内卡波济肉瘤相关疱疹病毒（Kaposi sarcoma-associated herpesvirus,KSHV）裂解复制周期的影响。方法:（1）采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（CCK-8）分别检测不同浓度蔗糖亚砷酸酯在不同时间段（12、24、36、48、72 h）对体外培养的BCBL-1细
目的:本实验以草果不同极性部位提取物为研究对象,一方面考察草果不同极性部位提取物对小鼠的免疫调节活性;另一方面,利用体外抗氧化活性实验进行活性追踪,明确草果抗氧化药效物质。方法:（1）采用环磷酰胺法建立免疫低下小鼠模型,通过一般情况观察、体重变化、免疫器官指数、脾脏组织切片、外周血白细胞计数、外周血T淋巴细胞（CD3+）及其亚群CD4+/CD8+细胞、细胞因子IL-2等指标,探讨草果不同极性部位提
气候变化深刻影响粮食生产,保障粮食生产的稳定性以实现农业气候资源的高效持续利用为前提。本文首先应用逐级递减的机制法模型测度我国粮食主产区玉米、水稻、小麦三大主要粮食作物的作物生产潜力,运用LMDI分解方法对作物生产潜力的影响因子进行分解,然后利用重心转移模型分析实际生产力对作物生产潜力的重心偏离情况,最后评估了实际生产力对作物生产潜力的气候资源利用效率。研究主要结论如下:（1）1980-2018年
词类标注Part＿of＿Speech tagging,是用于检测单词中标注是否正确的数据处理技术,也被称为标注POS tagging。它是对自然语言处理过程中不可或缺的流程,是信息检索,短语识别,机器翻译、文本分类等使用场景的技术基础[1]。在语言交流中运用名词的情况最多。随着现代信息技术的迅速发展,汉语,英语等各种语言的名词词类标注研究在一定程度上得到了发展,但维吾尔语名词词类标注为主要研究方向
莫言作为中国首位诺贝尔文学奖的获得者,其作品具有深远的意义和较高的知名度,但是在新疆地区,莫言文学作品跨语际译介的相关研究较少。本文综合运用翻译学、译介学等方法和理论,对莫言作品在新疆少数民族地区的译介与传播进行研究。通过对莫言作品在新疆文学场域内的传播、翻译、翻译策略等相关问题研究,探讨莫言作品国内跨语际传播的方向和途径。本文对莫言作品在新疆的译介和传播情况做一个整体梳理,揭示当代主流文学对新疆