大鼠孕期单纯低T4血症机制的初步探讨

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目的从动物水平探讨不同孕期Wistar大鼠血清及垂体组织甲状腺功能变化并初步探讨孕期单纯低T4血症的机制。1、探讨不同孕期Wistar大鼠血清与垂体组织甲状腺激素变化。2、探讨不同孕期Wistar大鼠垂体组织TSHβ表达水平的变化。3、探讨不同孕期Wistar大鼠垂体组织脱碘酶表达丰度及功能变化。4、探讨不同孕期Wistar大鼠垂体组织甲状腺激素转运蛋白的表达变化。方法选用6-8周龄Wistar雌性大鼠,按照孕期进程将雌鼠随机分为4组:孕早期组(孕7d)、孕中期组(孕14d)、孕晚期组(孕20d)和未孕对照组,每组各15只。除对照组外,其余各组与雄鼠合笼,分别于妊娠第7天、第14天、第20天心脏取血,留取各组Wistar大鼠血清,化学发光分析法测定各组大鼠血清FT3、FT4和TSH;留取各组Wistar大鼠垂体,应用化学发光分析法测定各组大鼠垂体匀浆FT3、FT4和TSH,应用实时荧光定量PCR检测TSHβ、D2、D3、Mct8、Oatp1c1m RNA的表达水平,应用Western-blot测定不同孕期D2、D3、Mct8、Oatp1c1蛋白的表达水平。所得数据结果用(`x±s)表示,采用SPSS21.0统计软件分析实验数据,各实验组与阴性对照组之间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),F值检验,进一步组间两两比较采用LSD检验(方差齐)或Tamhane’s T2检验(方差不齐)。P<0.05有统计学意义。结果1.大鼠血清FT3、FT4水平随孕期逐渐下降,与对照组相比,孕晚期有统计学差异(P<0.05);TSH水平各组无统计学差异。2.大鼠垂体匀浆T4水平随孕期逐渐下降,与对照组相比,孕晚期有统计学差异(P0.05),TSH水平各组差异无统计学意义。3.孕期各组大鼠垂体TSHβm RNA水平与对照组无统计学差异,与血清及垂体TSH水平变化相吻合。4.大鼠垂体D2m RNA和蛋白表达量随孕期变化逐渐增高,与对照组相比,孕晚期显著升高(P<0.05)。5.妊娠期各组D3、Mct8、Oatp1c1m RNA和蛋白表达量与对照组无统计学差异。结论1.Wistar大鼠血清甲状腺激素在孕期不同阶段呈逐渐下降的动态改变,于孕晚期明显降低,血清TSH和垂体TSHβm RNA水平不变。其与人体孕期甲状腺功能变化规律基本一致。2.大鼠垂体组织不同孕期T4于孕晚期下降最明显,T3和TSH水平均无明显变化,这与血清的变化规律明显不同。3.在垂体组织中,Ⅱ型脱碘酶(D2)表达水平随孕期延长逐渐升高。大鼠体内可能通过上调D2m RNA和蛋白表达,使T4在垂体中被D2脱碘转变成T3的量增加,垂体组织FT3对TSHβm RNA表达的负反馈作用减弱,使血清TSH不变。提示Ⅱ型脱碘酶的变化可能为妊娠期单纯低T4血症的发病机制。
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