80%的肺癌类型是非小细胞肺癌(NSCLC),其致死率位于所有癌症中的首位。NSCLC患者就诊时常见于癌症晚期,放、化疗效果欠佳。转移性NSCLC的中位生存期只有8-10个月。目前,以酪氨酸激酶抑制剂(TKI)为代表的分子靶向治疗已成为NSCLC患者的主要治疗手段,可以有效延长对肿瘤特定基因突变患者的生存期。Gefitinib是酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的一代药物,用于治疗携带EGFR激活型突变的NSCLC患者。治疗初期,大多数携带EGFR突变的NSCLC患者对TKI敏感,但治疗8-9个月后大约80%-90%的患者会产生TKI耐药性。目前,对于Gefitinib耐药的NSCLC患者,尚无明确的机制和有效的治疗方法。丝氨酸-精氨酸蛋白(SR)激酶1(SRPK1)是SRSF1/2的激酶,包含PKC超家族激酶结构域。我们课题组前期研究表明,SRPK1可以增强NSCLC的干性,而癌症干细胞与肿瘤耐药的发生密切相关,提示我们,SRPK1可能在NSCLC Gefitinib耐药中起着关键作用。本文围绕SRPK1参与NSCLC Gefitinib耐药的机制开展实验方法以及相关实验研究。主要研究内容如下:1.对Gefitinib敏感及耐药细胞检测SRPK1的表达水平,发现SRPK1在NSCLC Gefitinib耐药细胞中高表达,在NSCLC Gefitinib敏感细胞中低表达并通过GSEA分析验证SRPK1与Gefitinib耐药显著相关。2.在体内体外检测构建的SRPK1的高低表达细胞对Gefitinib的敏感性,发现高表达SRPK1通过抗凋亡促进NSCLC Gefitinib耐药,而下调SRPK1的表达则通过促进凋亡增强Gefitinib的敏感性。3.对信号通路激活的情况研究发现,SRPK1直接与GSK3β相互作用,增强GSK3βSer9的自磷酸化,抑制β-catenin降解,促进β-catenin入核,从而激活Wnt/β-catenin信号通路及增强其下游抗凋亡相关基因的表达,因此,SRPK1通过活化Wnt/β-catenin信号通路促进NSCLC对Gefitinib的耐药。综上所述,本研究发现SRPK1参与NSCLC Gefitinib耐药,并确定SRPK1在Wnt/β-catenin信号通路中的重要作用,为SRPK1成为Gefitinib耐药NSCLC患者新的治疗靶点提供科学依据。