目的：探讨胆红素对脐血单核细胞(cord blood monocyte，CBMC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)表达和IL-1β、IL-8分泌的影响。 方法： 1.单核细胞的分离及鉴定 无菌条件下采集正常足月新生儿脐静脉血100ml左右，采用纤维连接蛋白结合法分离得到单核细胞。流式细胞仪技术检测单核细胞纯度，0.4％台盼兰检测细胞活性。 2.实验分组 本实验共设7组，分别为空白对照组(A)、LPS对照组(B)、6mg/dl胆红素组(C)、6mg/dl胆红素+LPS组(D1)、9mg/dl胆红素+LPS组(D2)、12.9mg/dl胆红素+LPS组(D3)、18mg/dl胆红素+LPS组(D4)。将上述分离所得单核细胞置于24孔培养板中，分别加入不同浓度胆红素孵育1h，弃去胆红素，加入终浓度为1ug/ml的脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激细胞24h。收集细胞和上清液，细胞涂片固定后于4℃冰箱中保存备测；上清液低温离心后储存于-70℃冰箱中备测。 3.检测指标及方法 采用间接免疫荧光法检测细胞表面分子TLR4的表达；ELISA法检测上清液中细胞因子的水平。 结果：1.单核细胞的鉴定及活性检测经流式细胞仪技术检测，贴壁细胞的CD14阳性细胞率为(93.99±2.48)％：0.4％台盼兰检测细胞活性为(93.86±1.79)％。2.胆红素对单核细胞表达TLR4分子的影响①与空白对照组比较，LPS对照组TLR4表达率升高，差异无统计学意义(P>0.05)；6mg/dl胆红素组TLR4表达率降低，差异有统计学意义(P<0.05)。②不同浓度胆红素+LPS组的TLR4表达率均低于LPS对照组(P<0.05)；组间两两比较，D1组高于D2、D3、D4组，D2组高于D3、D4组，D3组高于D4组，差异均有统计学意义(P<0.05)。③CBMC表面分子TLR4表达率与胆红素浓度呈负相关(r=-0.874，P<0.001)。3.胆红素对单核细胞分泌IL-1β的影响①与空白对照组比较，LPS对照组分泌IL-1β的水平升高，差异有统计学意义(P<0.05)；6mg/dl胆红素组分泌IL-1β的水平降低，差异无统计学意义(P>0.05)。②不同浓度胆红素+LPS组与LPS对照组比较，6mg/dl胆红素+LPS组分泌IL-1β的水平降低，差异无统计学意义(P>0.05)；其余各组均低于LPS对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。组间两两比较，D1组高于D3组、D4组，D2组高于D4组：差异有统计学意义(P<0.05)。③CBMC分泌IL-1β的水平与胆红素浓度呈负相关(r=-0.755，P<0.001)。4.胆红素对单核细胞分泌IL-8的影响①与空白对照组比较，LPS对照组分泌IL-8的水平升高，6mg/dl胆红素组分泌IL-8的水平降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。②不同浓度胆红素+LPS组分泌IL-8水平均低于LPS对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；不同浓度胆红素+LPS组总体比较、组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。③CBMC分泌IL-8水平与胆红素浓度呈负相关(r=-0.611，P<0.001)。5.CBMC分泌IL-1β、IL-8水平与TLR4表达率均呈正相关(相关系数分别为rIL-1β=0.673，rIL-8=0.511，p<0.001)。 结论：1.胆红素改变细胞形态，破坏细胞结构，抑制单核细胞表达TLR4分子和分泌细胞因子，对单核细胞有明显的毒性作用，随着胆红素浓度的升高，这种毒性作用越明显。2.CBMC分泌IL-1β、IL-8水平与TLR4表达率呈正相关，提示胆红素抑制细胞因子分泌的机制可能与细胞表面分子TLR4有关，TLR4表达降低可能是细胞因子分泌减少的原因之一。3．胆红素抑制单核细胞表面分子TLR4的表达与细胞因子的分泌，影响新生儿单核细胞的功能，可能是黄疸患儿免疫功能低下的原因之一。