目的：牙周炎是牙周致病菌作用于牙周支持组织,进而刺激宿主免疫系统,诱导免疫细胞浸润及免疫因子趋化,最终造成牙周支持组织发生进行性破坏的一类具有多种病因和致病因素特点的复杂疾病。在牙周致病菌诱导牙周炎发生之后,宿主产生的过度免疫应激反应进一步加重了牙周软组织发生破坏、牙槽骨丧失,从而导致牙周病的进展。因此研究牙周炎反应过程中机体免疫产生的损伤相关分子模式（Damage associated molecular patterns,DAMPs）在牙周炎环境中的作用特点对于深入认识牙周炎进展的机制具有重要意义,并且对临床牙周炎治疗具有一定的实际意义。在牙周炎发生发展的过程中存在多种DAMPs,其中细胞外游离核酸（cell-free deoxyribonucleic acid,cfDNA）在机体免疫反应过程中,对于促进炎症反应发挥重要的作用。在自身免疫疾病中cfDNA的促炎作用逐渐被大家重视,但cfDNA在牙周炎中的作用特点尚不清楚。本实验的目的是研究cfDNA在牙周炎发生发展过程中的作用,研究结果将为临床治疗牙周炎的方法提供新的思路。方法：本研究通过建立C57BL/6小鼠牙周炎模型,在建立牙周炎模型后不同时间点（7天、14天、21天）分别对实验组小鼠和对照组小鼠血浆中的cfDNA水平进行检测。同时收集不同时间点实验组和对照组的小鼠标本,通过苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin,H＆E）染色和微计算机断层扫描技术（Micro computed tomography,Micro-CT）观察牙周炎进展程度、牙槽嵴吸收情况及炎症细胞浸润水平,应用免疫荧光（Immunofluorescence,IF）检测牙周炎小鼠不同时间点的cfDNA在牙周组织的分布情况。在体外模拟牙周炎症环境,用大肠杆菌的细菌脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激RAW264.7后收集其受到刺激后释放到细胞上清中的cfDNA。将收集纯化的cfDNA用lipo2000转入MC3T3-E1细胞中,成骨诱导21天后,用茜素红染色分析cfDNA对MC3T3-E1细胞成骨作用的影响。以及对培养14天的MC3T3-E1细胞进行实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR）以分析成骨相关因子的基因水平变化,通过蛋白免疫印迹（Western Blot,WB）检测分析成骨因子的蛋白水平变化。结果：H＆E染色和Micro-CT可见与对照组相比,实验组的小鼠在建模第7天的时候,牙槽嵴顶到釉牙骨质界距离明显增宽,牙槽骨发生明显的丧失,中性粒细胞和巨噬细胞等炎症细胞浸润明显。而随着炎症进展到建模第14天时,牙槽骨丧失水平逐渐加重,炎症细胞浸润与第7天相比,数量减少。而免疫荧光结果显示,与对照组相比,牙周炎组的细胞核出现不同程度的破坏,游离的DNA水平明显升高。与对照组相比,在建模第7天时,牙周组织内的cfDNA处于较高水平,随后开始逐渐下降。巨噬细胞在炎症状态下,AIM2炎症小体基因水平显著升高,IL-1β、TNF-α等炎症因子基因水平也显著升高。巨噬细胞来源cfDNA刺激后的MC3T3-E1细胞成骨作用被明显的抑制且抑制作用呈浓度依赖性。与对照组相比,实验组成骨相关因子如OPN、RUNX2、OCN的基因表达减少;RUNX2、COL-1、OCN的蛋白表达也明显减少。结论：1.牙周炎小鼠牙周组织的炎症反应及骨丧失随时间逐步加重;2.牙周炎小鼠血浆中cfDNA浓度升高;3.牙周炎小鼠牙周组织中cfDNA水平上升;4.LPS刺激后巨噬细胞释放cfDNA增多;5.巨噬细胞来源cfDNA抑制成骨细胞分化且呈浓度依赖性。