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论文以淡水鱼内脏为对象,研究制备具有高附加值及高生物催化活性的鱼复合酶产品,旨在充分利用淡水鱼内脏资源并为我国生物行业增加一种高品质的酶制剂来源。主要研究内容包括淡水鱼内脏基本成分分析,鱼内脏的预处理,柠檬酸钠缓冲液浸提粗酶液工艺参数的优化,硫酸铵分级沉淀条件的确定,分离膜的选择及除杂浓缩技术的研究和冷冻干燥工艺参数的确定。主要研究结果如下:1、淡水鱼内脏主要成分及含量:粗蛋白的含量为12%~20%,酶蛋白的含量为6%~10%,油脂的含量为25%~35%,灰分约为0.5%左右,水分约为25%左右。2、最佳浸提粗酶液的工艺条件:浸提温度为18℃,按照料液比1:5加入pH值为6.2,浓度为0.08mol/L的柠檬酸钠缓冲液,浸提时间为15min。粗酶液总活力为551764U,酶蛋白含量为5296mg。确定采用饱和度为30%~70%的硫酸铵分级沉淀以去除部分杂蛋白,所得到的酶活力占总活力的93.82%。3、实验通过超滤膜除杂和纳滤膜浓缩,最终浓缩液酶比活力,酶活力回收率和纯化倍数分别达到58659.4 U/mL,63.9%和1280.8倍。采用表面活性剂十二烷基磺酸钠、多聚磷酸钠及螯合物EDTA配制的复合清洗剂和柠檬酸清洗膜,可以使膜的纯水通量恢复到原始通量的96%以上。经SDS-PAGE,确定目标复合酶分子量分布在24.3~38.7 kD之间。4、确定最佳冷冻干燥的工艺条件:加热板温度为80℃,真空度为60Pa,物料厚度为10mm。冷冻干燥的效率可达到143.1 g×h-1×m-2左右。干燥后的鱼复合酶产品为淡黄色粉末,酶比活力达到9764.2U/g,含水量小于3%,具有很好的溶解性且未见不溶解的晶体,说明工艺操作参数设计合理,干燥程度把握恰当。证明采用冷冻干燥技术对纳滤膜浓缩液进行干燥是完全可行的。