【摘 要】
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目的:肺腺癌（adenocarcinoma of lung,ADC）以及肺鳞癌（squamous cell lung carcinoma,SCC）是两种主要类型的非小细胞肺癌（non-small-cell lung carcinoma,NSCLC）,本研究拟在前期研究基础上利用凝集素芯片技术,分别比较不同分期（III、IV期）ADC以及SCC与健康志愿者（HV）血清糖蛋白糖链的差异,以期发现与NS
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目的:肺腺癌（adenocarcinoma of lung,ADC）以及肺鳞癌（squamous cell lung carcinoma,SCC）是两种主要类型的非小细胞肺癌（non-small-cell lung carcinoma,NSCLC）,本研究拟在前期研究基础上利用凝集素芯片技术,分别比较不同分期（III、IV期）ADC以及SCC与健康志愿者（HV）血清糖蛋白糖链的差异,以期发现与NSCLC发展相关的糖链标志物,为NSCLC的诊断、分期及病理分型提供帮助。方法:1、利用凝集素芯片技术,同步检测不同病理类型（SCC43例、ADC 58例）、不同分期（III期30例,IV期68例）肺癌患者血清样本与50例健康志愿者对照样本的糖蛋白糖链谱;利用单因素方差分析法对糖链谱进行分析,筛选出与NSCLC相关的糖蛋白糖链。2、结合凝集素印迹技术,对凝集素芯片筛选得到的差异糖蛋白糖链进行验证。结果:1.两种类型NSCLC组与HV组对比,有7种凝集素（HHL、EEL、LCA、WGA、PTL-I、SNA、AAL）识别的糖链结构在这两种类型NSCLC患者血清中的表达水平均与HV对照组有显著性差异。其中,凝集素HHL、EEL、LCA、WGA和PTL-I识别的糖链结构在两种类型NSCLC患者血清中的表达水平均显著高于HV对照组,而SNA以及AAL识别的糖链结构在两种类型NSCLC患者血清中的表达水平均显著低于HV对照组（P＜0.05）。2.凝集素ECA、WFA、NPA、STL识别的糖链结构只在ADC组与HV对照组有显著性差异表达,凝集素LTL、GSL-I识别的糖链结构只在SCC组与HV对照组有显著性差异表达（P＜0.05）。3.不同分期NSCLC组与HV组对比,有7种凝集素（HHL、LCA、WGA、EEL、NPA、AAL和SNA）识别的糖链结构在III期和IV期中均与HV组有显著性差异表达。其中,HHL、LCA、WGA、EEL和NPA识别的糖链结构在III期及IV期NSCLC患者血清糖蛋白中的水平均显著高于HV对照组,而SNA以及AAL识别的糖链结构在III期及IV期NSCLC患者血清中的表达水平均显著低于HV对照组（P＜0.05）。4.不同分期ADC组与HV组相比,9种凝集素识别的糖链结构在ADC患者血清中的表达水平与HV对照组有显著性差异,其中,凝集素LCA识别的α-D-Man,Fucα1-6Glc NAc,α-D-Glc在III期和IV期ADC患者血清中的表达水平均显著高于HV对照组。而AAL以及SNA识别糖链结构在ADC患者血清中的表达水平均显著低于HV对照组（P＜0.05）。5.不同分期SCC组与HV组相比,7种凝集素识别的糖链结构在SCC患者血清中的表达水平与HV对照组有显著性差异,其中,凝集素LCA识别的α-D-Man,Fucα1-6Glc NAc,α-D-Glc在III期和IV期SCC患者血清糖蛋白中的水平均显著高于HV对照组,而AAL以及SNA识别糖链结构在SCC患者血清中的表达水平均显著低于HV对照组（P＜0.05）。6.凝集素WGA的印迹结果显示,ADC与正常相比,140 k Da左右的蛋白条带染色强度高于正常对照,而SCC与正常相比,140,90和50 k Da蛋白条带的染色强度均高于正常对照组。另外,凝集素EEL的印迹结果显示,ADC和SCC样本中约65 k Da蛋白条带的染色强度均高于正常对照组。这与凝集素芯片结果一致。结论:1、凝集素LCA,EEL,HHL,WGA,PTL-I,AAL和SNA识别的糖链结构可能有助于NSCLC的诊断。2、凝集素ECA、WFA、NPA、STL识别的糖链结构可能有助于ADC的诊断,凝集素LTL、GSL-I识别的糖链结构可能有助于SCC的诊断。
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