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受精是精子与卵子相互结合而启动新生命发育的过程。随着科学技术的进步和研究方法的发展,人们对受精过程的认识日渐深入。精子膜是精子与外界发生联系的第一门户,它不仅是精子活动和新陈代谢的基础,也是获能和精卵融合等受精过程的基础,而且抗精子抗体对精子的主要影响也发生在质膜上。因此,精子膜蛋白一直是众多学者的研究热点。目前,已经分离得到与精子的受精功能直接相关的数种蛋白成分。由于研究的便利,许多膜蛋白首先从动物的精子膜上分离得到,并在人精子膜上也发现了同源蛋白,其相关抗体均能抑制人精子的受精能力,因此这些蛋白有望成为人精子避孕疫苗的候选成分。 本研究基于其它哺乳动物(人、牛、猪、小鼠、豚鼠、猴等)精子膜蛋白的研究基础上,首先采用RT-PCR技术克隆了绵羊的四种精子膜蛋白基因,然后用RT-PCR方法和原位杂交技术在mRNA水平上检测了四种基因在绵羊睾丸组织和附睾不同部位的表达。最后用cDNA末端快速扩增技术得到了绵羊受精素β蛋白的编码序列。通过上述研究方法获得如下研究结果: 1.采用RT-PCR方法从绵羊睾丸组织中扩增出四种精子膜蛋白PH-20、PH-30、FA-1、LDH-C4的cDNA。经鉴定和序列分析的结果表明,四种基因序列与已知动物的相应序列有较高的同源性。 2.通过RT-PCR技术检测了四种精子膜蛋白基因的mRNA在绵羊睾丸组织和附睾不同部位的表达。其中PH-20和FA-1基因的mRNA在绵羊睾丸组织