头颈部鳞癌与人乳头瘤病毒的相关性研究

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目的:
  人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的持续性感染可以导致多种肿瘤的发生。宫颈癌、外阴癌、阴茎癌、肛门癌、头颈部和口腔癌均可以由感染HPV引起。据国外文献报导,本世纪初美国部分地区的HPV慢性感染已成为口咽鳞癌主要发病危险因素,这部分约占全部调查样本的75%。本世纪初,国内的一项报告显示,HPV相关口咽鳞癌为6.6%(17/256),HPV相关的口腔鳞癌中HPV患病率为7.0%(13/187)。但近些年呈上升趋势,其中导致感染机会显著增加的原因主要是不洁的性行为方式改变,例如:同性恋、口交及口肛交等。头颈部鳞癌(Head and neck squamous cell carcinomas,HNSCC)每年发病人数为60万,死亡人数30万人。2015年中国的唇,口腔,咽癌发病率为48/100000,死亡率为20/100000。西方国家HPV相关HNSCC的研究较多,而亚洲地区的研究不多见,研究的深度不够。HNSCC与持续性感染HPV关系的系统和深入的研究在我国同样未广泛开展。中国社会和经济的发展十分迅猛,人民的生活习惯,包括性生活习惯的变化明显,这些改变导致HPV相关的HNSCC的深入研究具有开展的必要性。
  方法:
  本研究通过收集广州及佛山地区头颈部鳞癌患者的病理组织石蜡切片,分析头颈部鳞状细胞癌与人乳头状瘤病毒的关系。样本采集于2009-2017年就诊于广东药科大学附属第一医院及佛山市第一人民医院的HNSCC患者,共收集225例患者的肿瘤石蜡切片,全部由病理结果证实;实验用脱烷剂提取DNA,特异性HPV序列引物扩增,琼脂糖凝胶电泳判断是否有HPV感染,并进行免疫组化方法检测P16蛋白在组织切片中的表达情况,最后选取HPV阳性标本进行人乳头瘤病毒基因分型检测。根据HPV的检测结果,我们将所有病例分为HPV阳性组,HPV阴性组两组,统计分析两组之间的相关性及其与患者年龄、吸烟史、饮酒史、肿瘤分期情况等临床病理特征之间的关系,并对HNSCC患者预后生存期进行分析。
  结果:
  在纳入研究的225例患者标本中,HPV病毒的总体阳性率达到了24.4%(n=55),HPV16型是最常被检测出的(n=32,71.1%),其次是HPV18型(n=2,4.45%)。其他亚型包括HPV6、11、33、82也均可以被检测到。P16检测结果与HPV基因检测结果明显不一致,在所有P16阳性的标本中,有71.4%(n=20)未检测到HPV病毒基因,而在所有P16阴性的标本中,有23.8%(n=47)检测到了HPV病毒基因。而分析性别、吸烟、饮酒、年龄四个因素对HPV感染的影响的结果显示:男性HPV感染率为28.6%,女性为10%;吸烟患者HPV阳性率为22.7%,非吸烟组HPV检测率则为26.5%;酒精组HPV感染率为28.3%,非饮酒组HPV阳性率为23.1%。65岁以下患者HPV检测率为26.1%,65岁以上患者HPV阳性率为19.6%,经Fisher‘sexact检验,P值分别为:0.008、0.5373、0.4023、0.1698。HPV阳性组与HPV阴性组相比有更高的生存率,但该差异无统计学意义。(Log-rank分析,P=0.246)。P16阳性组相比于p16性阴组有更高的生存率,但两者之间的差异同样无统计学意义(Log-rank分析,P=0.8383)。
  结论:
  1、头颈部鳞癌的发生与HPV感染有关,其中最常见的HPV基因类型为HPV16型;
  2、P16蛋白的检测及HPV-DNA在头颈部鳞状上皮细胞癌中的感染存在不一致,在头颈部鳞状细胞癌中不推荐通过检测P16蛋白的含量来预测HPV的感染情况。
  3、在广东地区头颈部鳞状细胞癌患者中,男性的HPV感染率明显高于女性,有统计学意义,而与吸烟、喝酒、年龄无显著相关。
  4、HPV阳性的头颈部鳞状细胞癌患者的预后生存时间明显长于HPV阴性患者;同时p16阳性的头颈部鳞状细胞癌患者的预后生存时间也明显长于p16阴性患者,但无统计学意义,这预示HPV与p16可能成为预测疾病预后的指标,需进一步证实。
  5、人乳头状瘤病毒相关的头颈部鳞状细胞癌在中国广东省总体头颈部鳞癌中占有相当一部分的比例,尤其是口咽鳞状细胞癌。面对这一定比例的头颈部鳞癌的发生,尤其是男性,应该考虑采取预防和治疗HPV的措施。HPV疫苗计划将有益于预防许多HPV相关的癌症。
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