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目的：
观察加味芪莲合剂（Observation of Qilian mixture）联合化疗治疗气阴两虚型IIIB或IV期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）患者的临床疗效及对机体免疫功能的影响，为其临床应用提供理论依据；选择前期研究明确的芪莲合剂中主要抑瘤成分——黄芪甲苷（Astragaloside IV）作为研究对象,通过动物实验探讨其抗肿瘤免疫应答相关机制。
方法：
1.临床研究：收集2017年10月至2019年10月于山东中医药大学第二附属医院呼吸科、肿瘤科住院治疗且符合纳入标准的NSCLC患者70例，随机分为治疗组和对照组，两组均接受AP（培美曲塞+顺铂）或DP（多西紫杉醇＋顺铂）化疗方案4周期（每21天为一个周期），治疗组在化疗基础上，接受口服加味芪莲合剂中药治疗4周期。评价并计算两组患者治疗前后中医证候单症评分及总积分、KPS评分（卡氏评分，Karnofsky，百分法），检测并记录治疗前后血清T细胞亚群，复查胸部强化CT评价治疗后实体瘤目标病灶近期疗效，记录治疗期间化疗及中药毒副反应发生情况，评价加味芪莲合剂的临床疗效及安全性。
2.实验研究：构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌种植瘤模型40只，随机分为AS-H[黄芪甲苷高剂量，0.8mg/（10g?d）]组、AS-M[黄芪甲苷中剂量，0.4mg/（10g?d）]组、AS-L[黄芪甲苷低剂量，0.2mg/（10g?d）]组、DDP[顺铂，0.15mg/（10g?2d）]组、MC(模型对照）组，共五组，每组8只，连续给药14天，另取未做处理的C57BL/6小鼠8只作为正常组（空白对照组），期间动态观察并记录各组小鼠异常行为及体征，每隔1天测量模型小鼠体重及种植瘤体积，灌胃结束后第二天处死各组小鼠，剖取各组小鼠脾脏、胸腺及种植瘤，称量脾脏及胸腺质量，计算脾脏、胸腺指数；HE染色（苏木精-伊红染色法）病理切片观察Lewis肺癌种植瘤组织形态；T细胞尼龙毛柱分离法分离Lewis种植瘤组织中T淋巴细胞，流式细胞术检测T淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞比例，计算CD4+/CD8+比值；Western Blot、qRT-PCR检测种植瘤瘤体中B7-H3（CD276）、Foxp3蛋白及mRNA表达水平。
结果：
1.临床研究：（1）纳入本次研究的70例患者中共有6例患者（治疗组2例，对照组4例）因化疗药物不耐受或不按规定用药等被移除本次研究；（2）对比完成本次临床试验的两组患者（治疗组33例，对照组31例）治疗前的一般基线资料均无统计学意义（P＞0.05）；（3）治疗后治疗组中医证候神疲乏力、口干咽燥单症评分及总积分下降均显著高于对照组（P＜0.01），在食欲不振评分、中医证候疗效、KPS评分及KPS功能状况疗效改善程度均优于对照组（P＜0.05）；（4）治疗后治疗组血清T细胞亚群CD3+、CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+水平显著高于对照组（P＜0.01）；（5）治疗组在治疗期间白细胞、血红蛋白降低及恶心呕吐毒副反应发生率方面均低于对照组（P＜0.05）；（6）对比两组患者实体瘤目标病灶近期疗效区别不大(P＞0.05）。
2.实验研究：（1）小鼠异常行为及体征：随种植瘤的生长，与正常组小鼠相比，其余五组小鼠均表现出精神萎靡，觅食、进食、饮水及活动减少，毛发无光泽等现象，其中AS-H、AS-M组动物行为及体征改变较正常组区别最小，DDP组最为明显，且毛发易脱落。（2）小鼠体重及瘤体体积：AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤体积均明显小于MC组（P＜0.01），且均大于DDP组（P＜0.01或0.05），但体重与MC组对比差别不明显（P＞0.05），DDP组种植瘤体积及体重均小于MC组(P＜0.01或0.05)。（3）小鼠脾脏、胸腺指数：AS-H、AS-M组脾脏指数均显著高于MC组(P＜0.01)，AS-L组脾脏指数与MC组差别不明显（P＞0.05）；AS-M组胸腺指数显著高于MC组(P＜0.01)，但AS-H、AS-L组与MC组比较无明显差异（P＞0.05）；且AS-H、AS-M、AS-L组脾脏指数、胸腺指数均显著大于DDP组（P＜0.01）。（4）流式细胞术：AS-H、AS-M组种植瘤肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+水平均显著高于MC组(P＜0.01)，AS-L组二者水平与MC组比较无明显差异（P＞0.05），仅AS-H组CD8+T细胞比例较MC组降低（P＜0.05），AS-M、AS-L组CD8+T细胞比例与MC组对比无明显差异（P＞0.05）；与DDP组比较，AS-H、AS-M、AS-L组小鼠CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+水平均显著升高，CD8+T细胞比例均明显降低，差异均有显著统计学意义（P＜0.01）。（5）Western Blot、qRT-PCR：AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤组织中B7-H3mRNA及蛋白水平较MC组均显著降低（P＜0.01），AS-H、AS-M组Foxp3mRNA及AS-H、AS-M、AS-L组Foxp3蛋白表达水平均低于MC组（P＜0.01或0.05），且AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤组织中B7-H3、Foxp3mRNA及蛋白表达水平均显著小于DDP组（P＜0.01）。
结论：
1.加味芪莲合剂联合AP或DP化疗治疗气阴两虚型晚期NSCLC患者，虽在近期内缩小肿瘤方面与单纯化疗比较无明显差异，但可有效改善患者生活和生存质量，减轻患者活动受限程度，提高机体免疫功能，降低骨髓抑制、消化道反应等毒副反应发生率，有助于提高患者对化疗的耐受性与依从性。
2.黄芪甲苷可提高Lewis肺癌荷瘤小鼠生存质量，抑制Lewis种植瘤生长，提高脾脏、胸腺指数，且以高、中剂量干预效果更佳，其机制可能是通过抑制种植瘤组织中B7-H3的表达，升高肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+T细胞比例，降低CD8+T细胞、Treg细胞比例，提高CD4+/CD8+比值，从而增强机体抗肿瘤免疫应答反应而实现的。
观察加味芪莲合剂（Observation of Qilian mixture）联合化疗治疗气阴两虚型IIIB或IV期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）患者的临床疗效及对机体免疫功能的影响，为其临床应用提供理论依据；选择前期研究明确的芪莲合剂中主要抑瘤成分——黄芪甲苷（Astragaloside IV）作为研究对象,通过动物实验探讨其抗肿瘤免疫应答相关机制。
方法：
1.临床研究：收集2017年10月至2019年10月于山东中医药大学第二附属医院呼吸科、肿瘤科住院治疗且符合纳入标准的NSCLC患者70例，随机分为治疗组和对照组，两组均接受AP（培美曲塞+顺铂）或DP（多西紫杉醇＋顺铂）化疗方案4周期（每21天为一个周期），治疗组在化疗基础上，接受口服加味芪莲合剂中药治疗4周期。评价并计算两组患者治疗前后中医证候单症评分及总积分、KPS评分（卡氏评分，Karnofsky，百分法），检测并记录治疗前后血清T细胞亚群，复查胸部强化CT评价治疗后实体瘤目标病灶近期疗效，记录治疗期间化疗及中药毒副反应发生情况，评价加味芪莲合剂的临床疗效及安全性。
2.实验研究：构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌种植瘤模型40只，随机分为AS-H[黄芪甲苷高剂量，0.8mg/（10g?d）]组、AS-M[黄芪甲苷中剂量，0.4mg/（10g?d）]组、AS-L[黄芪甲苷低剂量，0.2mg/（10g?d）]组、DDP[顺铂，0.15mg/（10g?2d）]组、MC(模型对照）组，共五组，每组8只，连续给药14天，另取未做处理的C57BL/6小鼠8只作为正常组（空白对照组），期间动态观察并记录各组小鼠异常行为及体征，每隔1天测量模型小鼠体重及种植瘤体积，灌胃结束后第二天处死各组小鼠，剖取各组小鼠脾脏、胸腺及种植瘤，称量脾脏及胸腺质量，计算脾脏、胸腺指数；HE染色（苏木精-伊红染色法）病理切片观察Lewis肺癌种植瘤组织形态；T细胞尼龙毛柱分离法分离Lewis种植瘤组织中T淋巴细胞，流式细胞术检测T淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞比例，计算CD4+/CD8+比值；Western Blot、qRT-PCR检测种植瘤瘤体中B7-H3（CD276）、Foxp3蛋白及mRNA表达水平。
结果：
1.临床研究：（1）纳入本次研究的70例患者中共有6例患者（治疗组2例，对照组4例）因化疗药物不耐受或不按规定用药等被移除本次研究；（2）对比完成本次临床试验的两组患者（治疗组33例，对照组31例）治疗前的一般基线资料均无统计学意义（P＞0.05）；（3）治疗后治疗组中医证候神疲乏力、口干咽燥单症评分及总积分下降均显著高于对照组（P＜0.01），在食欲不振评分、中医证候疗效、KPS评分及KPS功能状况疗效改善程度均优于对照组（P＜0.05）；（4）治疗后治疗组血清T细胞亚群CD3+、CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+水平显著高于对照组（P＜0.01）；（5）治疗组在治疗期间白细胞、血红蛋白降低及恶心呕吐毒副反应发生率方面均低于对照组（P＜0.05）；（6）对比两组患者实体瘤目标病灶近期疗效区别不大(P＞0.05）。
2.实验研究：（1）小鼠异常行为及体征：随种植瘤的生长，与正常组小鼠相比，其余五组小鼠均表现出精神萎靡，觅食、进食、饮水及活动减少，毛发无光泽等现象，其中AS-H、AS-M组动物行为及体征改变较正常组区别最小，DDP组最为明显，且毛发易脱落。（2）小鼠体重及瘤体体积：AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤体积均明显小于MC组（P＜0.01），且均大于DDP组（P＜0.01或0.05），但体重与MC组对比差别不明显（P＞0.05），DDP组种植瘤体积及体重均小于MC组(P＜0.01或0.05)。（3）小鼠脾脏、胸腺指数：AS-H、AS-M组脾脏指数均显著高于MC组(P＜0.01)，AS-L组脾脏指数与MC组差别不明显（P＞0.05）；AS-M组胸腺指数显著高于MC组(P＜0.01)，但AS-H、AS-L组与MC组比较无明显差异（P＞0.05）；且AS-H、AS-M、AS-L组脾脏指数、胸腺指数均显著大于DDP组（P＜0.01）。（4）流式细胞术：AS-H、AS-M组种植瘤肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+水平均显著高于MC组(P＜0.01)，AS-L组二者水平与MC组比较无明显差异（P＞0.05），仅AS-H组CD8+T细胞比例较MC组降低（P＜0.05），AS-M、AS-L组CD8+T细胞比例与MC组对比无明显差异（P＞0.05）；与DDP组比较，AS-H、AS-M、AS-L组小鼠CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+水平均显著升高，CD8+T细胞比例均明显降低，差异均有显著统计学意义（P＜0.01）。（5）Western Blot、qRT-PCR：AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤组织中B7-H3mRNA及蛋白水平较MC组均显著降低（P＜0.01），AS-H、AS-M组Foxp3mRNA及AS-H、AS-M、AS-L组Foxp3蛋白表达水平均低于MC组（P＜0.01或0.05），且AS-H、AS-M、AS-L组种植瘤组织中B7-H3、Foxp3mRNA及蛋白表达水平均显著小于DDP组（P＜0.01）。
结论：
1.加味芪莲合剂联合AP或DP化疗治疗气阴两虚型晚期NSCLC患者，虽在近期内缩小肿瘤方面与单纯化疗比较无明显差异，但可有效改善患者生活和生存质量，减轻患者活动受限程度，提高机体免疫功能，降低骨髓抑制、消化道反应等毒副反应发生率，有助于提高患者对化疗的耐受性与依从性。
2.黄芪甲苷可提高Lewis肺癌荷瘤小鼠生存质量，抑制Lewis种植瘤生长，提高脾脏、胸腺指数，且以高、中剂量干预效果更佳，其机制可能是通过抑制种植瘤组织中B7-H3的表达，升高肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+T细胞比例，降低CD8+T细胞、Treg细胞比例，提高CD4+/CD8+比值，从而增强机体抗肿瘤免疫应答反应而实现的。