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目的:明确补肾活血方治疗子宫内膜异位症的临床疗效和安全性;探索腹腔巨噬细胞和炎性因子在子宫内膜异位症模型小鼠进展过程中的动态变化特征以及腹腔粘连形成和异位灶生长的规律;研究补肾活血方对子宫内膜异位症免疫微环境的调控作用及腹腔粘连和异位灶生长的抑制作用;研究补肾活血方的有效单体姜黄素是否通过调控巨噬细胞极化影响子宫内膜间质细胞的侵袭和凋亡,并探索姜黄素对巨噬细胞的调控机制。方法:基于妇科门诊的临床常规诊疗数据,以孕三烯酮治疗组作为阳性对照组,分析补肾活血方治疗前后子宫内膜异位症患者临床症状评分、疼痛评分、生活质量评分、卵巢子宫内膜囊肿最大直径、血清CA125水平的变化情况,评价补肾活血方治疗子宫内膜异位症的疗效;分析患者接受治疗过程中不良反应的发生情况,评估补肾活血方的安全性。通过构建子宫内膜异位症小鼠模型,采用流式细胞术检测不同造模周期（1周、2周、4周、6周）的小鼠腹腔巨噬细胞的极化特征,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同造模周期（1周、2周、4周、6周）的小鼠腹腔炎性因子（IFN-γ、IL-12、TNF-α、TGF-β1、IL-10、IL-13）的表达水平,采用Blauer粘连评分系统对不同造模周期（1周、2周、4周、6周）的小鼠腹腔粘连程度进行评分,应用免疫组化实验检测不同造模周期（1周、2周、4周、6周）的小鼠腹腔子宫内膜异位灶纤维化相关蛋白（E-cadherin、Collagen I、α-SMA、SMMHC-Ⅱ）表达情况;采用上述实验方法研究各实验组（正常对照组、假手术组、模型组、孕三烯酮组、补肾活血方组）小鼠腹腔巨噬细胞的极化情况、炎性因子的表达水平、腹腔粘连程度、异位灶生长情况以及纤维化相关蛋白表达水平。在体外实验中,采用流式细胞术检测补肾活血方有效单体姜黄素对THP-1来源的巨噬细胞极化和炎性因子（IL-10和IL-12）分泌水平的调控作用;建立子宫内膜间质细胞和巨噬细胞的共培养体系,采用Transwell小室法检测经姜黄素干预48小时的巨噬细胞对子宫内膜间质细胞侵袭的影响;采用Annexin V/PI双染法检测经姜黄素干预48小时的巨噬细胞对子宫内膜间质细胞凋亡率的影响;采用转录组测序和生物信息学分析的方法探索姜黄素对巨噬细胞的调控机制。结果:1.共纳入子宫内膜异位症患者153例,其中补肾活血方组108例,孕三烯酮组45例,补肾活血方和孕三烯酮治疗的子宫内膜异位症患者临床症状评分、疼痛评分、生活质量评分和卵巢子宫内膜囊肿最大直径治疗前后比较均具有显著性差异（P＜0.05）,两组患者不良反应发生率分别为5.5%和35.5%。2.子宫内膜异位症模型小鼠腹腔巨噬细胞在病变早期M2/M1比值小于1,病变中后期M2/M1比值大于1;与空白对照组小鼠相比,模型组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率显著增高（P＜0.05）,炎性因子IFN-γ、IL-12、TNF-α、TGF-β1、IL-10、IL-13在整个病变过程中均显著升高（P＜0.05）;模型组小鼠腹腔粘连和纤维化程度在造模2周时即有显著差异,造模6周时最显著。3.与模型组比较,补肾活血方组小鼠腹腔子宫内膜异位灶体积显著减小（P＜0.05）,腹腔粘连评分显著降低（P＜0.05）,腹腔灌洗液TNF-α、TGF-β1、IL-12水平均显著降低（P＜0.05）,IFN-γ、IL-10、IL-13水平无明显差异（P＞0.05）,补肾活血方组小鼠腹腔M1型巨噬细胞比例显著升高（P＜0.05）,M2型巨噬细胞比例显著降低,M2/M1比值降低,巨噬细胞的吞噬率显著减低（P＜0.05）且与对照组相比无明显差异（P＞0.05）,纤维化相关蛋白E-cadherin表达显著增加（P＜0.05）,Collagen I、α-SMA、SMMHC-Ⅱ表达显著减少（P＜0.05）。4.体外实验结果显示,与对照组巨噬细胞（M0）相比,姜黄素（10μM）组巨噬细胞（M0+curcumin）M1和M2极化比例无明显差别（P＞0.05）,细胞培养上清IL-12和IL-10表达水平均无明显不同（P＞0.05）;IL-4组（20ng/ml）巨噬细胞（M0+IL-4）M1比例无明显区别（P＞0.05）,但M2比例显著增加（P＜0.001）,细胞培养上清IL-12水平无明显变化（P＞0.05）,而IL-10水平明显增高（P＜0.01）。与IL-4组巨噬细胞（M0+IL-4）相比,经IL-4和姜黄素同时干预48小时的巨噬细胞（M0+IL-4+curcumin）M1比例无明显变化,M2比例显著减少（P＜0.001）,细胞培养上清IL-12表达水平显著升高（P＜0.001）,IL-10表达水平显著降低（P＜0.001）。5.子宫内膜间质细胞和巨噬细胞共培养体系中,与对照组（M0）子宫内膜间质细胞相比,姜黄素（10μM）组（M0+curcumin）子宫内膜间质细胞侵袭能力和凋亡率均无明显区别（P＞0.05）,IL-4（20ng/ml）组（M0+IL-4）子宫内膜间质细胞侵袭能力显著增强（P＜0.01）,凋亡率显著下降（P＜0.01）;与IL-4（20ng/ml）组（M0+IL-4）子宫内膜间质细胞相比,IL-4+姜黄素组（M0+IL-4+curcumin）子宫内膜间质细胞的侵袭能力显著降低（P＜0.01）,凋亡率显著升高（P＜0.01）。6.生信分析结果显示,经姜黄素干预48小时的巨噬细胞（M2+curcumin）与对照组巨噬细胞（M2）差异基因功能富集涉及免疫激活、免疫应答、细胞代谢和细胞自噬等多种生物学过程,涉及的信号通路主要有m TOR信号通路、溶酶体信号通路、NOD（核苷酸结合寡聚化结构域）样受体信号通路等。结论:补肾活血方可改善子宫内膜异位症患者相关临床症状,缓解疼痛,缩小卵巢子宫内膜囊肿,提高生活质量,且安全性较好;子宫内膜异位症腹腔免疫微环境在疾病进展过程中呈现动态变化特征,早期以“促炎反应的”M1样巨噬细胞为主,中后期以“损伤修复的”M2样巨噬细胞为主,腹腔粘连和纤维化程度随疾病进展逐渐加重;补肾活血方可调控子宫内膜异位症模型小鼠腹腔巨噬细胞极化和炎性因子的表达,抑制腹腔粘连的发展及异位病灶的生长;补肾活血方有效单体姜黄素通过抑制巨噬细胞向M2极化抑制子宫内膜间质细胞的侵袭并诱导其凋亡;姜黄素通过多途径、多靶点调控巨噬细胞极化,其机制有待进一步研究。