屎肠球菌BZ2所产抑菌物质的特性研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:rztest
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为了得到具有抑菌活性的菌株,采用双层琼脂扩散法对分离自内蒙古锡盟地区酸马奶中具有抑菌活性的乳酸球菌BZ2进行鉴定,并对其所产抑菌物质特性和抑菌产物的粗提方法进行探讨,结果如下:排除有机酸和过氧化氢干扰后,菌株BZ2发酵离心后的无细胞发酵上清液(the cell-free supernatant,CFS)对Listeria monocytogenes CMCC54002 仍然有抑制作用,经蛋白酶处理后对L.monocytogenes CMCC54002的抑菌活性丧失,表明菌株BZ2所产抑菌物质中含有蛋白类物质;经形态学、生理生化试验、16S rRNA序列分析后鉴定为 Enterococcus.faecium。E.faecium BZ2所产的抑菌物质在pH2.0-6.0的范围内,121℃处理15min后仍然对L.monocyt genes CMCC54002具有抑菌活性,在不同的有机溶剂、表面活性剂、金属离子和紫外线的处理下,抑菌活性均未发生明显变化。由E.faecium BZ2产生的抑菌物质具有较宽的抑菌谱。抑菌物质在37℃培养12 h后开始产生,30 h抑菌活性最高并保持稳定。抑菌物质在-20℃、4℃和常温下贮藏30 d后抑菌活性维持稳定,其对Lmonocytogenes CMCC54002的作用方式是杀死。通过对丙酮沉淀法、乙醇沉淀法与乙酸乙酯萃取法对E.faecium BZ2所产抑菌物质的分离效果进行比较,确定乙酸乙酯萃取法分离效果最佳且CFS与乙酸乙酯的最佳体积比为1:1。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测显示该抑菌物质的分子量在60-80 kDa之间。
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