胶质瘤（Glioma）是中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤,其中半数以上为恶性程度最高的胶质母细胞瘤（Glioblastoma,GBM）,即使采取目前最为规范的治疗:最大安全范围内的全切除辅以术后标准同步放化疗,但是病人预后仍然极差,中位生存期仅仅只有14.6个月。胶质瘤患者预后不良的主要原因在于胶质瘤具有增殖能力强、遗传背景异质性及放化疗抵抗等恶性表型。因此,寻找可以有效针对胶质瘤恶性进展的新型治疗方式,延长胶质瘤患者生存期、改善患者生存质量,是胶质瘤研究领域的重点。本实验室前期着眼于胶质瘤肿瘤实体外的肿瘤细胞研究,发现胶质瘤患者的肿瘤实体周边水肿带及以外区域中存在胶质瘤细胞,其生物学特性与肿瘤实体胶质瘤细胞（“C细胞”）不同,并将其命名为“Q细胞”。本实验室认为,这些存在于手术难以切除区域的肿瘤细胞正是胶质瘤反复复发、难以根治的元凶,针对Q细胞的研究有望真正解决胶质瘤难治性这一世界难题。随着分子生物学研究技术的不断发展,人们对包括胶质瘤在内的肿瘤的致病机理有了更全面的认知。WHO修订的2016版中枢神经系统肿瘤分类在现有组织学分类的基础上,首次将分子亚分型融入于胶质瘤分类,打破了近百年来组织学分类的传统,对胶质瘤的认识已达到前所未有的深度。本实验室前期利用转录组测序的方式发现Q细胞与C细胞表达谱之间存在差异,我们试图通过深入探讨差异表达的因子解释Q细胞生物学行为,为胶质瘤的治疗提供新思路。既往对胶质瘤分子表型特征的探讨多围绕基因水平,为胶质瘤的诊断提供了多个分子病理指标,如IDH1突变、染色体1p/19q共缺失、TERT基因突变、p53基因突变等,也有众多研究把目光投向了转录水平,针对胶质瘤中基因的特异表达情况进行探讨。可变剪接是基因转录成前体mRNA后,翻译成具有生物学功能的蛋白前的一个重要过程,既往也不乏对胶质瘤可变剪接的研究,证实了在剪接因子的调控下,同一基因的不同剪接异构体在胶质瘤中发挥了不同的生物学作用。可变剪接的调控影响到最终发挥功能的蛋白的结构,对剪接异构体的研究能更直接、真实地反映分子在肿瘤中的意义,在胶质瘤分子研究中具有重要前景。RSRP1（arginine/serine-rich protein 1）是一个在Q细胞中高表达的分子,本研究通过对其进行生物信息学分析及分子生物学实验验证,证实了其在胶质瘤中对基因可变剪接具有调控功能。同时,经过对胶质瘤公共数据库平台及南方医院神经外科胶质瘤标本临床数据的分析,明确了 RSRP1在胶质瘤中的临床意义;通过体内外实验阐明了 RSRP1在胶质瘤恶性进展中发挥的重要作用。第一章 RSRP1在胶质瘤恶性进展中执行的生物学功能及其临床意义目的:探讨RSRP1这一新型分子在胶质瘤中临床意义及其参与的生物学功能。方法:下载胶质瘤公共数据平台（TCGA、GEO）的mRNA表达谱数据及临床数据,利用生物信息学分析的方法分析平台中胶质瘤样本的RSRP1 mRNA相对表达量与患者预后的相关性;同时通过免疫组化的方法检测胶质瘤临床标本的RSRP1相对表达量,结合临床数据分析胶质瘤中RSRP1蛋白表达水平与患者预后的相关性。通过表达沉默的方法在胶质瘤细胞系中干扰RSRP1的表达,体内外实验检测干扰后胶质瘤细胞的生物学功能（增殖、凋亡、侵袭、迁移）改变情况。结果:临床数据分析结果皆显示,RSRP1高表达与胶质瘤患者预后呈负相关;干扰RSRP1表达后,胶质瘤细胞的凋亡水平上升,侵袭迁移能力下降。结论:RSRP1是胶质瘤患者预后情况预测的一个良好指标,RSRP1高表达提示患者预后不良;RSRP1在胶质瘤恶性进展中参与凋亡抵抗、促进侵袭迁移的作用。第二章 RSRP1通过调控可变剪接促进胶质瘤恶性进展目的:探讨RSRP1发挥促进胶质瘤恶性进展的相关分子机制。方法:利用生物信息学分析的方式预测RSRP1参与的分子生物学过程,主要通过分析RSRP1的结构域、相互作用蛋白、共表达基因三部分进行预测。通过转录组测序及RTPCR验证RSRP1参与胶质瘤功能的具体机制。通过酵母双杂交及蛋白免疫共沉淀实验验证RSRP1的相互作用蛋白。结果:生物信息学分析提示RSRP1在胶质瘤中可能与基因的可变剪接调控相关。转录组测序结果提示RSRP1可能调控了下游大量肿瘤相关基因的剪接形式,RTPCR进一步证实了测序结果。免疫共沉淀实验证实RSRP1可与可变剪接相关蛋白相互作用。结论:RSRP1在胶质瘤细胞中通过调控肿瘤相关基因的剪接形式参与胶质瘤恶性进展的生物学过程。