【摘 要】
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牛呼吸道疾病（Bovine respiratory disease,BRD）是牛场最常见的一种疾病,同时也是造成牛死亡的重要疾病之一。近年来,针对呼吸道菌群的结构与多样性的相关研究成为越来越多的学者的研究方向,BRD牛呼吸道菌群的特征依然是一个值得深入研究的课题。甘胆口服液及麻杏石甘散均为中医经典药方,为了提供这两种药物用于治疗BRD患牛的科学依据,研究两种药物作用于BRD牛后上呼吸道的菌群结构、
【基金项目】
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四川省科技厅科技计划（No.2019YJ0671;No.2019YJ0650）；
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牛呼吸道疾病（Bovine respiratory disease,BRD）是牛场最常见的一种疾病,同时也是造成牛死亡的重要疾病之一。近年来,针对呼吸道菌群的结构与多样性的相关研究成为越来越多的学者的研究方向,BRD牛呼吸道菌群的特征依然是一个值得深入研究的课题。甘胆口服液及麻杏石甘散均为中医经典药方,为了提供这两种药物用于治疗BRD患牛的科学依据,研究两种药物作用于BRD牛后上呼吸道的菌群结构、多样性及丰度,从呼吸道微生态角度探讨甘胆口服液及麻杏石甘散对预防和治疗疾病的可能性。试验于2020年3月至4月之间,在四川某规模化奶牛场选取20头自然发病BRD犊牛,随机分为两组,每组各10头,BRD诊断当天采集鼻拭子和血样;两组犊牛分别喂服0.2 m L/kg.BW的甘胆口服液和0.75 g/kg.BW的麻杏石甘散,每日一次,连续治疗七天后再次采集鼻拭子和血样。评价临床疗效结果显示甘胆口服液治疗组和麻杏石甘散治疗组的BRD牛,其临床症状均得到了明显的改善,但是甘胆口服液对BRD牛的临床疗效要优于麻杏石甘散。依据治疗前后动物临床症状评分（WI评分）、血清急性期蛋白浓度（HP、SAA）和抗氧化指标（MDA、SOD、GSH）评价各组疗效,结果显示:甘胆口服液剂量组治愈率达到70%,麻杏石甘散组治愈率达到60%,各组BRD犊牛急性期蛋白水平显著降低（P＜0.05）和氧化应激状态得到缓解,试验结果确证了甘胆口服液与麻杏石甘散对犊牛BRD治疗的有效性,且甘胆口服液的临床疗效略优于麻杏石甘散。采用16S rDNA扩增子测序技术,对口服7天甘胆口服液的BRD牛鼻拭子样本进行菌群结构及组成的生物信息学分析,ɑ多样性分析结果显示,Chao指数、Shannon指数及Simpson指数在用药前后差异不显著（P＞0.05）,表明甘胆口服液治疗前后BRD牛鼻拭子样本的多样性和丰富度相似;β多样性分析结果显示,PCo A分析、NMDS分析组间样品点交集较多,治疗前后差异不显著（P＞0.05）,表明甘胆口服液治疗前后上呼吸道群落结构差异性较小。BRD牛经甘胆口服液治疗后,上呼吸道菌群中纤维杆菌门（Fibrobacteres）、不动杆菌属（Arthrobacter）相对丰度显著低于用药前（P＜0.05）,而肠杆菌属（Enterobacter）、短芽孢杆菌属（Brevibacillus）和火山岩菌属（Vul-caniibacterium）相对丰度显著高于用药前（P＜0.05）。对口服7天麻杏石甘散的BRD牛鼻拭子样本进行菌群结构及组成的生物学信息分析,ɑ多样性分析结果显示,Chao指数、Shannon指数及Simpson指数在用药前后差异不显著（P＞0.05）,表明麻杏石甘散治疗前后BRD牛鼻拭子样本的多样性和丰富度相似;β多样性分析结果显示,PCo A分析、NMDS分析组间样品点交集较多,治疗前后差异不显著（P＞0.05）,表明麻杏石甘散治疗前后上呼吸道群落结构差异性较小。BRD牛经麻杏石甘散治疗后,在门水平上,菌群差异并不显著,而在属水平上,链球菌属（Streptococcus）的相对丰度在用药后出现显著升高（P＜0.05）,而拉恩氏菌属（Rahnella）、埃希氏-志贺氏杆菌属（Escheri-chia-Shigella）、沙雷氏菌属（Serratia）的相对丰度则相比用药前显著降低（P＜0.05）。对两药物进行比较,ɑ多样性比较结果显示,Chao指数、Shannon指数及Simpson指数差异不显著（P＞0.05）,表明甘胆口服液与麻杏石甘散治疗后BRD牛鼻拭子样本的多样性和丰富度相似;β多样性比较结果显示,PCo A分析、NMDS分析组间样品点交集较多,二者差异不显著（P＞0.05）,表明甘胆口服液与麻杏石甘散治疗后上呼吸道群落结构差异性较小。甘胆口服液与麻杏石甘散治疗后的BRD牛,其上呼吸道菌群相对丰度甘胆口服液治疗组的组纤维杆菌门（Fibrobacteres）和巴氏杆菌属（Pasteurella）相对丰度显著低于麻杏石甘散治疗组（P＜0.05）。结论:麻杏石甘散与甘胆口服液对BRD牛治疗后对比,呼吸道菌群丰度及多样性变化不大,但甘胆口服液与麻杏石甘散相比,其治疗BRD牛后,上呼吸道部分机会致病菌（如巴氏杆菌属）丰度显著降低（P＜0.05）。麻杏石甘散和甘胆口服液均可有效的治疗牛呼吸道疾病,改善其临床症状,甘胆口服液对BRD牛的临床疗效要略优于麻杏石甘散。
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