【摘 要】
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目的:骨肉瘤（Osteosarcoma,OS）是恶性肿瘤中的一种常见于青少年的原发性骨恶性肿瘤,其具有非常高的致残率,且易发生早期转移和耐药而出现较高致死率。既往研究表明长链非编码RNA是一个大家族,其在骨肉瘤的增殖、迁移及侵袭中起到重要的作用。LINC01503属于长链非编码RNA家族一员,研究证实其在很多肿瘤中促进肿瘤的增殖、迁移及侵袭的能力。但LINC01503在骨肉瘤中是否能够促进其增殖、
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目的:骨肉瘤（Osteosarcoma,OS）是恶性肿瘤中的一种常见于青少年的原发性骨恶性肿瘤,其具有非常高的致残率,且易发生早期转移和耐药而出现较高致死率。既往研究表明长链非编码RNA是一个大家族,其在骨肉瘤的增殖、迁移及侵袭中起到重要的作用。LINC01503属于长链非编码RNA家族一员,研究证实其在很多肿瘤中促进肿瘤的增殖、迁移及侵袭的能力。但LINC01503在骨肉瘤中是否能够促进其增殖、迁移及侵袭的能力还缺乏相关研究。此次的主要研究内容为通过体外实验,综合性的探索LINC01503在骨肉瘤细胞中的生物学作用。方法:（1）利用荧光定量PCR法测定LINC01503在人骨肉瘤细胞系MNNG/HOS、MG-63以及U2OS和正常人成骨细胞系中的各自表达情况。（2）使用小干扰RNA处理骨肉瘤细胞系,使LINC01503在骨肉瘤细胞系中呈现低表达状态,通过细胞计数试剂盒-8、平板克隆形成实验、划痕实验（伤口愈合实验）和Transwell迁移侵袭实验探究骨肉瘤细胞系中低表达LINC01503对骨肉瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力的改变。（3）在骨肉瘤细胞系中通过腺病毒载体形成LINC01503过表达的人骨肉瘤细胞系,利用细胞功能学实验验证过表达LINC01503在骨肉瘤细胞中增殖、迁移及侵袭能力变化的作用。（4）使用小干扰RNA处理骨肉瘤细胞系,使LINC01503在骨肉瘤细胞系中呈现低表达状态,通过Western Blot实验验证敲低LINC01503对骨肉瘤细胞EMT过程的影响。结果:（1）在三种人骨肉瘤细胞系MNNG/HOS、U2OS及MG-63中LINC01503的实时荧光定量PCR显示与人成骨成骨细胞中相比处于高表达状态;（2）利用LINC01503的小干扰RNA处理人骨肉瘤细胞系MNNG/HOS与MG-63明显降低MNNG/HOS与MG-63的增殖活性、迁移和侵袭活动的能力;（3）通过腺病毒载体成功形成LINC01503过表达的人骨肉瘤细胞系MNNG/HOS与MG-63稳转株,过表达并激活LINC01503证实骨肉瘤细胞MNNG/HOS与MG-63的增殖活性、迁移及侵袭的能力明显增强。（4）利用LINC01503的小干扰RNA处理人骨肉瘤细胞系MNNG/HOS与MG-63,降低LINC01503在骨肉瘤细胞中表达水平,抑制了骨肉瘤细胞EMT过程。结论:长链非编码RNA LINC01503在人骨肉瘤细胞系中处于高表达状态,该高表达状态与骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭的能力存在正相关,并可能和骨肉瘤细胞的EMT过程相关,这种相关性为骨肉瘤的诊断及治疗提供了相关靶点的可能。
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