【摘 要】
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目的 构建原核表达系统,表达内含人免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus,HIV-1)部分RNA序列的病毒样颗粒,该病毒样颗粒所含的HIV重组RNA(reRNA)因被噬菌体衣壳蛋白
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的 构建原核表达系统,表达内含人免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus,HIV-1)部分RNA序列的病毒样颗粒,该病毒样颗粒所含的HIV重组RNA(reRNA)因被噬菌体衣壳蛋白包裹而具有耐核糖核酸酶(RNase)特性;同时,因HIV的部分蛋白与病毒样颗粒一起表达,从而使该颗粒具有HIV病毒的部分免疫反应性.结论本研究得到的表达载体pNCCL1-HIV及原核表达系统,可以作为构建和制备耐RNase的HIV RNA标准品和质控品的平台.如可以直接作为HIV核酸测定中的阳性质控物和某些HIV RNA外标定量测定的外标定量标准;可以为HIV-1 RT-PCR检测试剂盒和实验室室间质量评价提供无生物传染危险性的样本.如果对pNCCL1-HIV中的HIV检测的目的片段进行缺失、插入和突变等修饰,所获得的病毒样颗粒可以作为HIV定量测定中的内标标准和HIV-1 RT-PCR测定的内标质控物.在本研究中,HIV-1 gag蛋白也被证实表达于病毒样颗粒上.这提示我们可以在该病毒样颗粒表面表达某些细胞受体的配体.表达有相应配体的病毒样颗粒可以用作研究病毒与宿主细胞相互作用的模型,可以用来作为定向运输小分子药物、反义RNA的工具.此外,在病毒样颗粒表面表达有相应的抗原表位可以用来研究疫苗.
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