猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是一种以妊娠母猪严重繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为特征的传染病，也称为“猪蓝耳病”，其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)。该病自1987年在美国发生以来，在世界范围内对养猪业打击严重，造成了巨大的经济损失。2006年，我国爆发了以高热、高发病率、高死亡率为特征的“猪高热病”，后经大量学者研究证实该病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒缺失变异毒株引起。PRRSV基因组的高变异性以及其特殊的生物学特性是造成PRRSV难以防控的重要原因，因此对PRRSV毒株的变异情况进行监测是防控PRRS的关键手段。　　本研究从广东省某疑似蓝耳发病猪场采集临床组织病料，进行病毒分离，分离到一株PRRSV命名为HD-GD-2011，该株病毒可在Marc-145细胞中稳定传代，并产生明显细胞病变(cytopathic effect，CPE)；与PRRSV荧光抗体结合能产生特异性荧光。对其全基因进行序列测定和分析，结果显示其与美洲型参考株(VR-2332)和欧洲型参考株(LV)的核苷酸序列相似性分别为89.1％和60.6％，与国内分离的美洲型毒株JN-HS的相似性最高，达到99.2％。PRRSV HD-GD-2011株在Nsp2上有30个氨基酸的不连续缺失，与我国2006年多个省份流行的高致病性蓝耳病毒株的核苷酸和氨基酸相似性很高。系统进化树结果也显示该毒株与国内高致病性变异株同属一个分支。最终确定分离株PRRSV HD-GD-2011为美洲型变异株。　　有研究人员在通过计算机技术对PRRSV病毒进行深入分析时，发现了另外一个比较保守的ORF，这个ORF被命名为ORF5a，ORF5a和ORF5的5’端重叠。ORF5a编码GP5a蛋白，而这个新的蛋白有可能是马动脉炎病毒的第8个结构蛋白。研究人员依据反向遗传平台使ORF5a表达失活，发现病毒在体外的增殖能力下降，研究结果表明GP5a对病毒感染很重要。此蛋白可在感染的细胞内表达，并在感染PRRSV的猪体内能够产生GP5a蛋白的抗体。GP5a蛋白的发现为PRRSV的免疫学及抗病毒方面的研究提供了新的视角。　　本研究针对PRRSV XH株的ORF5a设计了一对特异性引物，扩增出ORF5a基因，构建原核表达质粒pET-32a-ORF5a，转化表达宿主菌BL21进行原核表达，经Western-Blot鉴定，表明成功对ORF5a进行了原核表达，通过可溶性分析，发现该蛋白为可溶性蛋白，为进一步对GP5a进行研究奠定了一定的基础。