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背景和目的:
痤疮是一种发病率和复发率高的毛囊皮脂腺疾病,重度痤疮是一种毁容性疾病,对患者的生活、心理带来的负面影响不可小觑。光动力疗法是一种针对重度痤疮的、起效快、疗效好、选择性高的药械联用技术,目前在作用机制方面的研究主要集中在对痤疮丙酸杆菌、抗炎及对毛囊皮脂腺的影响,而对皮肤微生物群落结构的研究几乎没有。本研究将通过16srRNA高通量测序分析对照组与重度痤疮患者的皮肤菌群差异及光动力治疗过程中菌群的变化与重度痤疮症状改善的关系,以进一步揭示微生物在痤疮发病机制中的作用及光动力治疗重度痤疮的作用机制,以期达到精准治疗及预防重度痤疮的发生,从而避免因治疗痤疮而消耗大量医疗资源和社会财富。
方法:
1、纳入2018年10月至2019年10月在汕头大学医学院第一附属医院皮肤科门诊行光动力治疗的重度痤疮患者13例,并纳入对照组8例。
2、受试者予光动力治疗,每周1次,共3次。
3、受试者分别在治疗前(0周)、第一次光动力治疗后1周(1周)、第二次治疗后1周(2周)和第三次治疗后1周(3周)采集样本,依次为PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组,并采集8例对照组样本作为H组。
4、将所取样本进行DNA提取、PCR扩增、文库构建、测序和生物信息学分析。结果:
1、本实验痤疮患者在进行1、2、3次光动力治疗后的有效率分别为23.07%、46.15%、76.92%,疗效逐渐升高。
2、51个样本共产生3333535条优化序列,门水平上5组均以放线菌门、厚壁菌门、变形菌门占主要优势,属水平上,H组以丙酸杆菌属、葡萄球菌属占主要优势,PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组均以丙酸杆菌属、棒状杆菌属占主要优势;种水平上5组均以痤疮丙酸杆菌为主。
3、在Alpha多样性方面,H组的Chao1,Shannon指数均高于PT-B组,但无统计学差异。在PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3四组之间的Chao1,Shannon指数无显著差异。
4、在Beta多样性方面,通过Anosim分析发现,H组与PT-B组之间的R=0.018,P=0.371;H组与PT-T3组之间的R=0.070,P=0.227;PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组之间的R=0.051,P=0.127,均表示组内相似度大于组间相似度,但无显著差异;痤疮患者个体间的R=0.324,P=0.001,表示组内相似度大于组间相似度,存在显著差异。
5、通过组间物种差异性分析,H组与PT-B组中存在统计学差异的物种有Curvibacter、Staphylococcus、Pseudomonas、Sediminibacterium、Burkholderia、Streptococcus(P<0.05)。光动力治疗前(PT-B)与三次治疗后(PT-T3)中存在统计学差异的物种在属水平上有Methylobacterium、Streptococcus、Bacteroides、Sediminibacterium、Acinetobacter(P<0.05),在种水平上存在差异的有Rothiaaeria(P<0.05)。
结论:
1、光动力疗法是治疗重度痤疮起效快、有效率高,安全性高的治疗方法。
2、重度痤疮患者与对照组在菌群多样性、群落结构上均不具有统计学差异,但在Curvibacter、Staphylococcus、Pseudomonas、Sediminibacterium、Burkholderia、Streptococcus(P<0.05)等存在显著差异,这些或许是造成重度痤疮的关键物种。
3、光动力治疗对患者菌群多样性没有显著影响,但治疗后的样本群落结构有向对照组聚类倾向。且对Methylobacterium、Streptococcus、Bacteroides、Sediminibacterium、Acinetobacter、Rothiaaeria(P<0.05)产生显著影响,这些或许是光动力有效治疗重度痤疮的关键物种。
痤疮是一种发病率和复发率高的毛囊皮脂腺疾病,重度痤疮是一种毁容性疾病,对患者的生活、心理带来的负面影响不可小觑。光动力疗法是一种针对重度痤疮的、起效快、疗效好、选择性高的药械联用技术,目前在作用机制方面的研究主要集中在对痤疮丙酸杆菌、抗炎及对毛囊皮脂腺的影响,而对皮肤微生物群落结构的研究几乎没有。本研究将通过16srRNA高通量测序分析对照组与重度痤疮患者的皮肤菌群差异及光动力治疗过程中菌群的变化与重度痤疮症状改善的关系,以进一步揭示微生物在痤疮发病机制中的作用及光动力治疗重度痤疮的作用机制,以期达到精准治疗及预防重度痤疮的发生,从而避免因治疗痤疮而消耗大量医疗资源和社会财富。
方法:
1、纳入2018年10月至2019年10月在汕头大学医学院第一附属医院皮肤科门诊行光动力治疗的重度痤疮患者13例,并纳入对照组8例。
2、受试者予光动力治疗,每周1次,共3次。
3、受试者分别在治疗前(0周)、第一次光动力治疗后1周(1周)、第二次治疗后1周(2周)和第三次治疗后1周(3周)采集样本,依次为PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组,并采集8例对照组样本作为H组。
4、将所取样本进行DNA提取、PCR扩增、文库构建、测序和生物信息学分析。结果:
1、本实验痤疮患者在进行1、2、3次光动力治疗后的有效率分别为23.07%、46.15%、76.92%,疗效逐渐升高。
2、51个样本共产生3333535条优化序列,门水平上5组均以放线菌门、厚壁菌门、变形菌门占主要优势,属水平上,H组以丙酸杆菌属、葡萄球菌属占主要优势,PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组均以丙酸杆菌属、棒状杆菌属占主要优势;种水平上5组均以痤疮丙酸杆菌为主。
3、在Alpha多样性方面,H组的Chao1,Shannon指数均高于PT-B组,但无统计学差异。在PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3四组之间的Chao1,Shannon指数无显著差异。
4、在Beta多样性方面,通过Anosim分析发现,H组与PT-B组之间的R=0.018,P=0.371;H组与PT-T3组之间的R=0.070,P=0.227;PT-B、PT-T1、PT-T2、PT-T3组之间的R=0.051,P=0.127,均表示组内相似度大于组间相似度,但无显著差异;痤疮患者个体间的R=0.324,P=0.001,表示组内相似度大于组间相似度,存在显著差异。
5、通过组间物种差异性分析,H组与PT-B组中存在统计学差异的物种有Curvibacter、Staphylococcus、Pseudomonas、Sediminibacterium、Burkholderia、Streptococcus(P<0.05)。光动力治疗前(PT-B)与三次治疗后(PT-T3)中存在统计学差异的物种在属水平上有Methylobacterium、Streptococcus、Bacteroides、Sediminibacterium、Acinetobacter(P<0.05),在种水平上存在差异的有Rothiaaeria(P<0.05)。
结论:
1、光动力疗法是治疗重度痤疮起效快、有效率高,安全性高的治疗方法。
2、重度痤疮患者与对照组在菌群多样性、群落结构上均不具有统计学差异,但在Curvibacter、Staphylococcus、Pseudomonas、Sediminibacterium、Burkholderia、Streptococcus(P<0.05)等存在显著差异,这些或许是造成重度痤疮的关键物种。
3、光动力治疗对患者菌群多样性没有显著影响,但治疗后的样本群落结构有向对照组聚类倾向。且对Methylobacterium、Streptococcus、Bacteroides、Sediminibacterium、Acinetobacter、Rothiaaeria(P<0.05)产生显著影响,这些或许是光动力有效治疗重度痤疮的关键物种。