碱热处理钛片表面对成骨细胞生长及细胞骨架蛋白影响的研究

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【目的】研究碱热处理的钛片表面对成骨细胞形态、粘附、增殖、分化及细胞骨架结构的影响。 【材料和方法】将直径为15mm,厚1mm的医用纯钛钛片分组进行表面处理:①以240目、360目、600目砂纸逐级打磨得到机械打磨组(grooved,G组);②采用356~411μm TiO2喷砂处理,得到喷砂(sandblasted,SB)组。③以63.6%的H2SO4和10.6%的HCL混合液在60~70℃时酸蚀SB组的钛片10min得到酸蚀处理组(sandblasted and acid-etched,SLA)。④由G组、SB组、SLA组,经5mol/L氢氧化钠60℃水浴24小时,600℃处理1小时,得到光滑碱热组(AH1,grooved alkali-heated)、喷砂碱热组(AH2,sandblasted alkali-heated)、喷砂酸蚀碱热组(AH3,acid-etched and alkali-heated)。用电子探针、X射线衍射仪、扫描电镜检测6组钛片表面理化性质,采用激光共聚焦显微镜及扫描电子显微镜观察、MTT法、碱性磷酸酶活性(ALP)及骨钙素分泌(OC)检测来比较6组表面对成骨细胞的形态、粘附、增殖、分化及细胞骨架的影响。数据采用单因素方差分析及配对t检验(a=0.05)。 【结果】扫描电镜观察成骨细胞形态 成骨细胞在各表面上培养1小时后,呈球形。培养2、4、12、24小时后,细胞逐渐伸展,体积明显增大,G组、AH1组细胞长轴与沟纹方向一致,呈扁平的多角形,粗糙表面细胞因表面不规则而形态各异,SB组细胞铺展于凹窝表面,AH2、AH3、SLA组细胞片足进一步向三维方向铺展,进入二级孔洞或附着在表面隆起点边缘,悬挂胞体于凹窝上方,形成多角形的三维网络结构。细胞粘附率 粗糙表面组细胞粘附率优于光滑表面组。各时间点SB组OD值均高于其他组(P<0.05)。成骨细胞与钛片培养1小时后,细胞粘附OD值SB组>AH2组,AH3组>SLA组,G组>AH1组(P<0.05);2小时SB组>AH2组,AH3组>SLA组(P<0.05),G组与AH1组差异无显著性
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