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目的：研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因在小鼠黑色素瘤移植瘤体内的表达及其对黑色素瘤的抑制作用。方法：1.B16细胞培养从液氮罐里取出并复苏B16细胞,接种于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液的培养瓶中进行培养,传代。2.黑色素瘤B16细胞小鼠皮下移植瘤模型的建立待观察C57BL/6小鼠一周后,一般状况良好的情况下,收集对数生长期的B16细胞,在无菌条件下每只以5×10.cells/ml接种于小鼠背部皮下,观察小鼠移植瘤的生长情况。3.IL-24基因治疗黑色素瘤B16细胞小鼠移植瘤的影响将荷瘤鼠随机分为3组,每组6只,在瘤体内注射脂质体包裹的重组质粒pEGFP-N1-IL-24(10μg)为实验组,注射脂质体包裹的空载质粒pEGFP-N1(10μg)、注射PBS(0.2m1)为阴性对照组。每3天注射一次,共注射4次。每次注射药物前先用游标卡尺测量肿瘤的长径(L)和短径(W),计算肿瘤体积,并绘制肿瘤的生长曲线。4.在末次注射药物后7天断颈处死小鼠,剥离肿瘤组织。小部分组织冰冻用于RT-PCR鉴定,剩余部分组织冰冻用于Western蛋白印迹法检测Bax蛋白的表达。5. RT-PCR方法检测移植瘤组织中IL-24mRNA的表达从各组移植瘤组织中提取总RNA,逆转录合成cDNA,与IL-24上下游引物,进行PCR反应,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,并查看目的条带6. Western蛋白印迹法检测移植瘤组织中的Bax蛋白的表达提取各组移植瘤组织中的蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,转膜,封闭,加入抗体与目的蛋白产生反应,显影、定影后,观察目的蛋白的表达水平。结果：1.成功建立了黑色素瘤移植瘤小鼠模型,接种细胞后第12天小鼠皮下肿瘤直径均达5mm,肿瘤移植率达100%；2.肿瘤生长曲线图表明重组质粒pEGFP-N1-IL-24组移植瘤的体积明显小于空载质粒pEGFP-N1组和PBS组,其差异有统计学意义(P<0.05),而空载质粒组和PBS组移植瘤体积则无明显差异(P>0.05)。与空载质粒pEGFP-N1组和PBS组相比,重组质粒pEGFP-Nl-IL-24组移植瘤生长缓慢,而空载质粒pEGFP-N1组和PBS组移植瘤生长曲线几乎平行；3.各组的肿瘤组织中提取了RNA,进行RT-PCR检测,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳显示重组质粒pEGFP-N1-IL-24组在611bp处有一阳性条带而空载质粒pEGFP-N1组和PBS组未出现此预期的条带；4.各组移植瘤组织中提取蛋白进行Western蛋白印记法,结果在重组质粒pEGFP-N1-IL-24组上出现了Bax蛋白的表达,而空载质粒pEGFP-N1组和PBS组未出现Bax蛋白的表达。结论：1. IL-24基因在黑色素瘤组织中稳定表达了其蛋白。2. IL-24具有抑制黑色素瘤B16细胞小鼠移植瘤生长的作用。3. IL-24对黑色素瘤组织有促进Bax蛋白分泌的作用。