miRNA是一类约20-24个核苷酸长度的内源单链非编码RNA分子,通过负调控基因的表达对细胞增殖分化、个体生长发育和抵御逆境胁迫等生理活动产生重要影响。植物miRNA主要通过m RNA剪切和翻译抑制调控靶基因表达,m RNA剪切后被降解,其蛋白水平也下降,而翻译抑制仅对蛋白水平有影响。有关影响植物miRNA选择m RNA剪切和翻译抑制这两种作用方式的因素仍未可知,已有文献报道早期认为的miRNA与靶基因的互补配对程度及靶基因的结合位点（5′-UTR、编码区或3′-UTR）并非决定性因素。本课题探究植物miRNA丰度等因素是否影响miRNA对作用机制（m RNA剪切和翻译抑制）的选择。我们通过构建组成型启动子（TUA2和PTB2）与人工miRNA（ami RSUL和ami RBAK1）的融合载体,获得一系列miRNA表达水平不同的拟南芥转基因纯合株系,检测靶基因m RNA和靶蛋白在稳定状态的相对丰度,通过比较两者之间的相对关系分析miRNA的作用方式;同时我们检测了靶基因m RNA在核糖体上的翻译效率,结合拟南芥中靶基因m RNA-seq的数据分析,得出以下几个结论:第一,ami RSUL主要介导对靶基因m RNA的剪切,随着ami RSUL表达水平的提高,SUL全长m RNA的丰度不断下降,SUL蛋白的水平也呈负相关变化,未检测到明显的翻译抑制;第二,伴随ami RSUL表达水平的升高,靶基因SUL的m RNA在多聚核糖体组分中的分布比例上升,暗示当其m RNA水平下降时,细胞可能通过提高翻译效率调节SUL这个光合作用必需基因的表达;第三,不同丰度的ami RBAK1主要介导翻译抑制,暂未检测到明显的靶基因m RNA的剪切;第四,该研究选取的报告基因的研究结果支持miRNA本身的丰度与其所选择的沉默方式无关;第五,BAK1 m RNA在MBP显著富集,然而通过分析已知的受翻译抑制调控的靶基因m RNA在MBP上的富集程度,并没有发现这些基因在MBP上的富集趋势,表明靶基因在MBP上的分布亦不是决定miRNA作用方式的必要条件。本研究通过探究拟南芥中miRNA作用机制选择的影响因素,为进一步明晰植物miRNA作用方式的分子机制指明方向。实验中所获得的影响翻译抑制的报告株系,也为将来进一步利用其进行影响翻译抑制基因突变体的遗传筛选,提供了非常宝贵的材料。