【摘 要】
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牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholic Acid,TCDCA)作为动物胆汁酸的主要有效成分,在胆汁发挥其生理作用的过程中具有重要的作用。大量研究发现,TCDCA具有显著的抗炎和免疫调
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牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholic Acid,TCDCA)作为动物胆汁酸的主要有效成分,在胆汁发挥其生理作用的过程中具有重要的作用。大量研究发现,TCDCA具有显著的抗炎和免疫调节作用。为了深入探讨TCDCA在发挥抗炎免疫调节调节作用时,对免疫细胞中TGR5受体介导的Ca2+-CaM信号途径的影响,本研究以大鼠肺泡巨噬细胞NR8383为研究对象,采用脂质体转染法将已经成功构建的pcMV-TGR5质粒转染到大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中,采用荧光定量PCR和Western Blot技术检测了转染pcMV-TGR5质粒的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中TGR5的表达;采用ELISA技术检测了TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中三磷酸肌醇(IP3)含量的影响;采用荧光探针法检测了TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中Ca2+浓度的影响;采用荧光定量PCR和Western Blot技术检测了TCDCA对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中CaM表达的影响。结果显示,转染pcMV-TGR5质粒的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中TGR5受体的表达均高于未转染细胞,TGR5受体在大鼠肺泡巨噬细胞NR8383成功表达;TCDCA可通过与TGR5受体结合进而使大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中IP3的浓度显著升高,大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中Ca2+浓度显著提高;TCDCA还能够促进大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞中CaM基因和蛋白的表达。以上结果提示,TCDCA产生的抗炎免疫调节作用与其激活TGR5受体介导的Ca2+-CaM信号途径有关。
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